奶牛drb3.基因与主要病原菌性乳房炎相关性研究.pdf

奶牛DRB3．2基因与主要病原菌性乳房炎相关性研究 摘 要 奶牛乳房炎是由多种原因引起的奶牛乳腺炎症，使奶牛生产性能下降，严重 危害我国奶牛业的发展。导致奶牛乳房炎的病原种类众多，给该病的预防和治疗 带来困难。随着分子生物学技术的迅速发展，分子抗病育种成为防治奶牛乳房炎 以其丰富的多态性和高度连锁不平衡等特点，受到遗传育种学家的高度重视。很 多国内外学者从MHc基因与体细胞数相关性、与单一病原体易感程度的相关性， 与乳房炎易感性和抗性等几个方面进行了研究。本试验对224头泌乳期中国荷斯 坦奶牛进行了乳房炎检测，并对主要病原菌进行了分离鉴定，检测了BoLA—DRB3 第二外显子的基因多念性，并分析了各基因型与3种主要病原菌引起乳房炎的相 关性。本试验为开展分子抗病育种进行初步尝试。 1 奶牛乳房炎的检测与主要病原的分离鉴定 使用兰卅I畜牧兽医研究所研制的乳房炎诊断试剂，对山东省济南、东营两地 及其周边地区大型奶牛场的224头泌乳期的中国荷斯坦奶牛进行乳房炎检测，检 出患病奶牛占所检牛群的72．32％。对乳房炎阳性乳样进行细菌分离，纯培养和 生化鉴定，结果共分离到11种病原菌，其中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳 链球菌为主要致病菌，由这3种病原菌引起的乳房炎占总患病牛只的86．2l％。 根据细菌的16sRNA等特异性保守基因序列设计引物，对金黄色葡萄球菌、大肠 杆菌和无乳链球菌进行了PCR鉴定，与生化鉴定结果一致。 2奶牛BoLA．DRB3．2基因PCR．RFLP分析 I两个酶切位 性。结果表明，所检测牛群中BoLA，DRB3．2基因在HaeIII和Rsa I 点，存在丰富的多态性。HaelII酶切位点存在4种等位基因，有4种基因型：Rsa 酶切位点存在3种等位基因，有4种基因型。经#适合性检验，所检测牛群中 BoLA．DRB3．2基因在HaellI和Rsa I这两个酶切位点上均未达到Hardy—weinberg 平衡状态。 3相关性分析 将分离鉴定乳房炎致病菌的种类和数量数据与基因型数据整合，通过SAS 数据分析软件，分析BoLA．DRB3．2基因各基因型与奶牛对金黄色葡萄球菌、大 肠杆菌和无乳链球菌性乳房炎的易感程度的相关性。结果表明：HaetIIBC基因 IEE，RsaI EF基因 型与金黄色葡萄球菌感染引起的奶牛乳房炎显著相关，Rsa 型与大肠杆菌感染引起的奶牛乳房炎显著相关。本试验为奶牛乳房炎抗病基因的 筛选提供了有价值的参考数据。 关键词：DRB3．2基因，PCR-11FLP，奶牛乳房炎，致病菌 ll andMastitis betweenCattleDRB3．2Gene Relationship CausedMain Bacteria by Pathogenic Abstract traitofcattleandcause caused offactors 1he large Mastitis bylots degradesproduction too to ortreatfo