家蚕和野桑蚕sx-lethal基因的研究.pdfVIP

家蚕和野桑蚕＆》klh耐基因的研究 家蚕和野桑蚕弘彪历口廛因的研究 中文摘要 家蚕的性别属于雌性异型配子决定机制，雌性化月删基因的研究一直没有实质 性进展。果蝇跏基因是其性别决定的主开关基因。本文研究了一个新发现的家蚕 砌删基因的时空差异性和性别差异性表达，探讨了砌．＆订基因在家蚕性别决定中 可能的作用。 Niinli，甜甜．2006)设计了特异引物，用 根据公布的砌?跚基因序列(Teru”lki RT．PCR技术对砌．＆，基因进行了扩增、分析。家蚕砌敏，基因在家蚕五龄中肠中 没有表达；但在五龄幼虫和蛹期的卵巢中均有表达，表达量无明显时期差异；在脂肪 体和血液中，熟蚕期砌．＆d基因表达丰度明显低于其它时期。家蚕砌．，基因在处 h卵龄的胚胎中有转录活性，与果蝇的跏 女蛾卵和产下O．5h卵中没有表达，但在30 基因活化启动时闻相近，推测家蚕8硒W基因可能和性别决定有关。酗般Z基因的 性别差异性表达分析结果表明，卵期雌雄表达存在差异，西”．f基因在雌卵中特异 性表达，进一步推测砌捌基因可能和性别决定有关。 野生鳞翅目昆虫与经过人工驯化饲养了几千年的家蚕可能存在较大的遗传变异。 为了解家蚕跚基因在其它鳞翅目昆虫中的遗传差异情况，从野桑蚕卵中克隆了两条 218 包含完整ORF框的西雄口”小跚基因片段(西加搬f-1为lbp，丑删日柑．＆，．2为 l279 bp)，进行了原核表达。野桑蚕的砌鲫d墩，基因克隆测序后，与家蚕相应的序 列比对发现，仅有11个和7个碱基差异，同源性达99．1％和99．4％．野桑蚕的 I位点之间，推测表达的 勘l口耐．＆f．i基因片段克隆在pEl也8a(+)的肋枷I和＆DR 融合蛋白包括341个氨基酸残基，其结构中均含有2个保守的RNA识别基序RRM。 k。含重组 使用SMS蛋白分子量在线工具包，计算出融合蛋白的分子量大小为37．77 质粒的BL2l菌体总蛋白电泳及Wbstem免疫印迹杂交都可检测到与理论分子量一致 的蛋白条带。因此，野桑蚕砌2d耐＆厶1基因与lIis6序列在大肠杆菌中成功实现融合 表达，为扬砌坳研究砌柳珏＆，基因功能提供了条件。 关键词：家蚕；野桑蚕；性别决定基因 家蚕和野桑蚕＆争k删基因的研究 StlIdiesoⅡ胁钯绣面Gene of曰D肼五肛肌口疗and 曰删6职r刀l口以dI玎嚏万口 ABSTRACT deIellninedZW has 11lescxoff缸lalesillcv煳mis by chromosomcs．11屺凡用gene notb嘲lf0啪dt0 of acentralroleill llp now．＆，gelleDm∞p11ilapIays sex^decI瑚inillg webill w鹤llsedto 2006．RT．PCR silkwo肿w鹬published蚰NCBl palllw妙砌，蹦of nle illdi日bremtissuesatdi丘bremtimesand∞xdi丘br龃ltial t0 stIldyexpression exp∞ssion