绵羊附红细胞体生物学检测及其对红细胞、t淋巴细胞影响的研究.pdfVIP

绵羊附红细胞体的生物学检测及其对红细胞、 T淋巴细胞影响的研究 学科、专业 ： 预防兽医学 2006届硕士研究生： 王 丽 指 导 老师 ： 剡根强教授 中文摘要 本文根据国内外羊附红细胞体病的研究现状，对采集于石河子规模化羊场临 床疑似附红细胞体感染血样进行鲜血压片检查、血片姬姆萨染色和透射电镜观 察，并进行血液红细胞数、血红蛋白含量、血细胞压积、超氧化物歧化酶(SOD) 和ATP酶及红细胞免疫功能、酸性Ⅱ一醋酸萘酯酶(Acid Acetate a-Naphthy Esterase，ANAE)几项指标的测定。本试验旨在通过检测自然感染附红细胞体羊 外周血中的几项指标，以探讨附红细胞体的致病性，为揭示该病的发病机理提供 理论依据。 结果显示：血液涂片姬姆萨染色后，附着在红细胞表面的羊附红细胞体呈紫 红色的圆点状。透射电镜下羊附红细胞体结构呈球形、环形。环形的羊附红细胞 体结构有明显的孔隙，在其胞质内有电子透明区域。 对姬姆萨染色和电镜观察确诊为羊附红细胞体感染的阳性血样，以文献报道 的方法分离纯化羊附红细胞体，抽提基因组DNA，根据羊附红细胞体的16SrRNA 基因参考序列的保守区，设计一对特异性引物(pl／p2)，对抽提基因组DNA进行 PCR检测，扩增出一段1169bp的DNA序列，与预期结果一致，说明PCR方法扩增出了 羊附红细胞体的特异条带。并经灵敏性试验证明，该方法特异、灵敏、快速，可 从分子水平上对附红细胞体病进行早期快速诊断和流行病学调查。 药敏试验结果表明几种不同的药物，除青霉素外，其他药物均有一定的疗效， 但药物联合治疗绵羊附红细胞体病具有更明显的效果。 附红细胞体感染羊红细胞的生理指标、免疫指标结果显示：随感染程度的增 加，以红细胞总数减少、血红蛋白浓度(HBG)和红细胞压积(PCV)、SOD酶活力和 ATPase酶活性显著降低为主要指征，出现严重的贫血症。 红细胞酵母花环(E-C3bRR花环)数在实验中随羊附红细胞体感染程度的增加 而下降、而红细胞免疫复合物花环(E-ICR花环)数在隐性组表现下降，急性感 染组中表现回升的趋势，说明红细胞在抗附红细胞体感染中起了一定作用，但由 于红细胞数量的减少，使参与机体非特异反应的红细胞免疫功能降低。活性T淋 巴细胞在酸性非特异性醋酸萘酯酶检测中呈下降趋势。 综合分析表明：羊附红细胞体感染不会引起较强的细胞免疫，但会使红细胞 免疫功能降低，从而减弱了机体抵抗外界感染的能力。 本研究为病原学鉴定、本病的预防和控制提供了理论依据。 关键词：绵羊附红细胞体：透射电镜：PCR；红细胞：T淋巴细胞；免疫功能 论文类型：A(理论研究)B(应用研究) Ⅱ ovisand on Biology Study testing(Biometricai)ofeperythrozoon of AndTof withNaturalInfection Erythrocyte sheep ovis Eperythrozoon Medicine Subject、Speciality：PreventiveVeterinary Graduate ：WangLi