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原油污染对土壤微生物生态系统的影响 　　摘要：本文选用低中高三种污染程度，研究原油污染对土壤微生物生态系统的影响，主要为受污染土壤中总石油烃的降解情况。 　　结果表明低原油含量的土壤，其微生物和非生物降解率高于高原油含量的土壤，在20天内降解率可以达到90%以上，而在高浓度污染时，50天内总降解率只能达到48%。 　　 　　关键词：石油烃，土壤污染，微生物降解 　　中图分类号：Q938.1+3 文献标识码：A 文章编号： 　　 　　绪论 　　石油是重要的能源，是现代工业的“血液”，现在世界石油的总产量每年近30亿吨多。然而石油的大量使用，也使得石油大量地进入环境，对生态环境和人类健康造成了潜在的危害。研究发现，石油污染将干扰污染区域生物群落的正常生理、生化活动，破坏化学信息联系，使生物的生长和繁殖受到严重损害。污染严重的区域，还会造成一些抗性弱的物种死亡，其生态系统的恢复需要十年以上的时间，进而危及人类的健康。 　　生物降解就是微生物新陈代谢的过程，即把有机污染物转化或矿化成低危害或无危害的物质，这些物质随后进入自然的生物地球化学循环。生物降解的程度受多种因素的影响，如营养、氧、pH、物质的结构组分及污染物的浓度和生物可利用性、物质的化学和物理性质及环境污染的过程等。与化学、物理方法相比，生物修复具有成本低，操作简单，处理效果好，对环境影响小，不产生二次污染等优点。 　　本文模拟被原油污染的生态系统，定量分析几个主要微生物指标，通过研究微生物的动态生长情况，来为受污染土壤的生物降解和修复提供理论基础和依据。 　　 　　土壤与原油 　　1、土样 　　土壤取自赤峰路63号“设计创意工场”园区内，除去砂砾和植物残留，经风干后碾碎，用孔径2mm的筛子筛选后保存备用。 　　2、石油烃 　　石油为大庆油田脱水原油，为黑色粘稠液体，降解性实验中所使用的原油以正己烷为溶剂。 　　3、含油土壤的准备 　　将经风干，碾碎，并用孔径2mm的筛子筛选后的土样调节土壤含水量为25%。与石油烃按一定比例混合，混合后土样含油量分别为1000mg/kg干土，5000mg/kg干土，50000mg/kg干土。另取土样灭菌，最后在超净工作台使用同样的方法加入原油，使得浓度同上。置生化培养箱30℃恒温培养，定期加水维持土壤的含水量。 　　 　　土壤中原油降解率的测定 　　1、标准曲线的绘制 　　配置100mL/L的标油：准确称量0.1g原油置于100mL容量瓶中，加入正己烷溶解并稀释至刻度线，得1g/L原油溶液。再用移液管准确移取10mL此溶液至100mL容量瓶中，正己烷定容，即可得到100mL/L的标油。 　　向10个10mL的比色管中分别加入0，0.4，0.8，1.6，2.0，2.5，3.0，4.0，5.0，6.0mL的100mL/L的标油，得到0，4，8，16，20，25，30，40，50，60mg/L的系列标油。在226nm波长下用石英比色皿，以正己烷为参比，测定吸光度。经空白校正后以吸光度-浓度做标准曲线。 　　2、原油降解率的测定 　　采用紫外分光光度法测定。称取5.0g土壤于碘量瓶，静置过夜。分两次加入正己烷各10mL，每次都需中速振荡30分钟以使其混合均匀，然后置于高速离心机离心15分钟。将上清液转移至25mL容量瓶中，将沉淀部分重复离心。收集两次振荡离心获得的上清液，使用正己烷定容，摇匀。采用分光光度法测定吸光度，通过标准曲线计算得到原油浓度。 　　3、实验结果和分析 　　（1）标准曲线 　　以测得的吸光度为纵坐标，标准油浓度为横坐标，绘制标准曲线。 　　 　　 　　图2-1原油降解率标准曲线 　　根据上图，可知线性相关系数R2=0.9990，吸光度A与浓度C的相关性方程为A=0.0161C+0.0004，整理得C=62.1118A-0.0248。 　　（2）总降解率的测定 　　不同浓度石油烃处理土样的总石油烃总降解率情况见下图： 　　 　　 　　图2-2不同浓度石油烃处理土壤样品的TPH总降解率 　　通过对总降解实验数据的考察，我们发现在低浓度（1000mg/kg）时，20天总降解率就能达到80%以上，到了第50天总降解率达到最高的96%。而对于中等浓度（5000mg/kg）和高浓度（50000mg/kg）则无法在实验限定的50天内达到90%以上的降解率，其中最高的降解率为高浓度50天的降解率，达48.1%。这表明含油浓度较低的土壤可以被较快和较有效的修复，含油浓度高的土壤则较难被修复。从三组不同浓度数据的总体趋势来看，随着土壤含油浓度的升高，降解效率逐渐降低，这可能是由于高浓度时原油对于细菌产生了毒副作用。同时考察同一浓度的降解率趋势，我们发现随着降解时间的延长，降解