【创新设计】(浙江专版)届高三生物二轮冲刺专题查补专题基因工程和克隆技术课件精品.pptVIP

第1讲　基因工程和克隆技术 考纲点击　1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理和技术(Ⅱ)。　3.基因工程的应用(Ⅰ)。4.植物的克隆(Ⅰ)。5.动物的克隆(Ⅰ)。 思维激活 1．基因工程和克隆技术涉及哪些工具酶？ 提示：基因工程的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，克隆技术的工具酶是纤维素酶、果胶酶、胰蛋白酶。 2．限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体的化学本质一样吗？DNA连接酶和DNA聚合酶有怎样的区别？ 提示：不一样。限制性核酸内切酶和DNA连接酶的化学本质是蛋白质，载体的化学本质是核酸。DNA连接酶连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。 3．细胞株与细胞系有何本质区别或联系？ 提示：细胞系是泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系。 自查 1．基因工程的核心是 。 2．基因工程的三种工具是： 、 及 ，如质粒。 3．基因工程发展史上第一个成功的实验是培养出了同时具有 性状的大肠杆菌，这标志着基因工程的诞生。 4．获得目的基因通常有两种办法，即针对目的基因序列已知者，可用 ；若基因序列未知者，则需 。 5．用 酶和 酶水解细胞壁，可以获得分离的植物细胞原生质体。 6．细胞克隆的基本要求是：必须保证分离出来的细胞是 。 7．提高细胞克隆形成率的措施包括选择适宜的培养基、添加 ，以 细胞支持生长， 刺激，使用 调节pH等。 自纠 1．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制。 (2013·安徽，6B)(　　) 2．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接。 (2013·安徽，6C)(　　) 3．关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度：乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞。(2011·上海，15A)(　　) 4．将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada。 (2011·浙江，6C)(　　) 5．用质粒中的抗生素抗性基因可以筛选出含有重组DNA的植物细胞。 (　　) 6．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端形成氢键。 (　　) 7．用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞膜的通透性。(　　) 8．用不同限制性核酸内切酶切割的DNA分子一定不能连接。 (　　) 9．具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞是生物克隆的重要条件之一。 (　　) 10．一般血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物，单抗则识别抗原分子的特殊部位，具专一性。(　　) 答案　1.×　2.×　3.√　4.×　5.×　6.×　7.× 8．×　9.√　10.√ 必考点一　基因工程 【典例1】 浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下面的问题。 (1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有________、________。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指________；步骤②用到的酶有___________________________。 (2)图中导入重组质粒的方法是________，在导入之前应用________处理受体细菌。 (3)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用________制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入________可将含有目的基因的细胞筛选出来。 (4)请你为该课题命