四川省食品动物性大肠杆菌耐药性监测及整合子——基因盒检测.pdf

。 Ji· ’：’ t ， ●． ：!、．·· 一： ℃-√ r；’ ’o t一^’ ’譬-～ - ●、 ～ 摘 要 伴随着抗菌药物在兽医临床的广‘泛使用，耐药菌株迅速}{{现，多重耐药现象十分 普遍，已经引起全世界的广泛关注。做好耐药性监测，从而指导兽医临床合理用药已 刻不容缓。对于细菌耐药性检测，传统的方法主要是进行耐药表型监测，随着分子生 物技术的发展，PCR技术在耐药基因型的检测及新耐药机制的发现方面发挥着重要 的作用。 本研究首先从四川省不同养殖场收集食品动物源大肠杆菌病样本，按常规的细菌 分离鉴定方法进行大肠杆菌菌株的鉴定。按照CLSI推荐方法及结果判断标准，应用 微量肉汤稀释法测定细菌对于不同抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)，从而对四川省 食品动物源大肠杆菌的耐药情况进行监测。对于多重耐药菌株，采用多重PCR技术 对其携带的3类整合子进行检测，同时对整合子阳性菌株进行基因盒分析。本次研究 分2部分完成。 、 1．不同食品动物源性大肠杆菌耐药性的监测 从四川不同地区规模较大的养殖场收集食品动物源(鸡源、鸭源、牛源、猪源) 大肠杆菌病样本，分离鉴定出705株大肠杆菌。采用微量肉汤稀释法进行了25种抗 菌药物的药敏实验。结果显示：705株大肠杆菌对25种抗荫药物表现出程度不同的 耐药性，特别是对兽医临床长期使用的I千l氧苄啶、复方新诺f纠、利福平的耐约率接近 100％；其次足对氰苄西林、四环素、氯霉索、氟唆诺酮类药物的刚约率均超过了70％： 对头孢唑啉、头孢噻吠、头孢曲松咆表现出一定的耐药性，耐药率分别为34．34％、 41．30％、26．25％，但中介率较高，可见大肠朴菌对p一内酰胺类药物存在耐药率上升 的趋势；本次：陡测发现所有大肠杆菌只有x,．tN米p星保持有一定的敏感性，敏感率超 过67％。 各种耐约谱，世中，23耐俯株所-与比率最人，其次为21i肘。不同动物源菌株耐药性比 较艟示，禽源闲株的I『iiJ药情况铰j酱源菌株，牛源菌株严重。1i同地区来源菌株耐药P扛 比较可见，不川地区来源睫f株刈‘所检测的25种约物耐药性分御大体一致，对部分药 物衷现出…定地域差异。 2．食品动物源’降大肠杆菌的整合子一璀因盒检测 浆』_fJ多iE 重PCR检测结果显示，在327株菌株中，294株细菌携带有I型整合酶基因，其检 出率为89．91％，本次检测未发现携带有lI型和III型整合酶基因的菌株。随机抽取I 型整合酶阳性菌株8l株，进行基因盒扩增，扩增结果显示14株I型整合酶阳性菌株 基糖苷类药物和氯霉素耐药。本次研究发现在2株鸡源大肠杆菌株中，发现了通过整 合子．基因盒携带的一种介导氨基糖苷类药物耐药的新基因aadA22，这是首次在四川 分离菌株中发现该基因的存在，其介导的耐药性有待进一步的研究。 关键词：食品动物源；大肠杆菌；耐药性；整合子一基因盒；检测 ABSTRACT Surveillance ofantimicrobial resitanceand detectionof integron cassettesEscherichia coliisolatesfrom gene among food．．animals