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检测j亚群禽白病病毒抗体的间接elisa方法建立和针对gp85蛋白的单克隆抗体研制
IoIillll21116
1011111151111
／4Y11111121111Y205021
和针对gp85蛋白的单克隆抗体研制
摘要
主要引起鸡的髓细胞瘤白血病，给世界上许多国家的养鸡业带来了巨大的经济损
失。AIMJ既可水平传播，又可垂直传播。目前，种群净化是防控J亚群禽白血病
的有效措施，因此有必要建立起准确、快速、灵敏的ALV-J检测技术。
09
本研究采用PCR方法克隆出本室分离保存的JS…9
将重组质粒转化大肠杆菌，以IPTG诱导表达gp85融合蛋白。表达的融合蛋白分
Ni—IDA GST
别用High·AffinityResin和High·Affinity
蛋白与等量弗氏完全佐剂乳化后免疫SPF鸡，每隔两周进行加强免疫，制备抗gp85
酶标记的羊抗鸡IgG为二抗，建立起检测ALv．J
min。
稀释倍数为1：500，血清作用时间为60
龄BALB／c小鼠，免疫剂量为200
rtg／只；每隔两周以相同的方法以弗氏不完全佐
剂与抗原乳化后加强免疫，免疫剂量为100
pg／只；第四次免疫后两周，以GST-gp85
融合蛋白按100 d后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／0融
pg／只的剂量加强免疫，4
性孔采用有限稀释法进行亚克隆，获得6株稳定分泌抗gp85单克隆抗体的杂交瘤
单抗进行相应生物学特性鉴定。Western．blot试验表明，研制的单抗针对舢ⅣJ
gp85
摘要
检测提供了新方法。
关键词：禽白血病病毒；gp85蛋白；间接ELISA；单克隆抗体
Abstract
for
EstablishmentofanIndirectELISA
Detecting
Antibodiesof JALVand of
Subgroup Preparation
MonoclonalAntibodies Protein
against
gp85
Abstract
Javianleukosis tothe ofavianleukosis
Subgroup virus(ALV—J)belongsgroup
virusoraviansarcomavirusina wasfustisolated
frombroilerchickens in199 inducedavian
byPayne 1；it
chicken
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