四省区鸡传染性气管炎病毒m、n基因分子流行病学研究.pdfVIP

四省区鸡传染性支气管炎病毒M、N基因 分子流行病学研究 摘要 本研究从浙江、安徽两地大型养殖场或养殖户发病或濒死鸡9份病料(气管、腺胃、肾 脏、盲肠扁桃体、输卵管)在9-11日龄SPF鸡胚盲传2—8代，共分离9株病原。死亡鸡胚 表现出生长发育障碍，弥漫性出血，未死亡鸡胚呈现典型的卷曲胚，尿囊液不凝集鸡的外周 血红细胞，病原经RT．PCR鉴定为传染性支气管炎病毒。 采用RT-PCR方法扩增了我国山东、安徽、浙江、四川四个省区的32株IBV地方分离株的 M基因和其中lO株的N基因，并对其进行了克隆、序列测定及同源性分析，构建了系统进化 树，阐明了本研究IBV分离株与疫苗株、国内外参考毒株之间的遗传演化关系，探讨了地方 分离株的来源。 225位氨 基酸长度为参考，其他毒株与两疫苗株M基因5’端长度差异情况为：Australia‘个’在5’端 1、IBV—w在M基因5’ 缺失3个氨基酸，7__J981、IBV—J在M基因5’端缺失2个氨基酸，JH05 正向重复序列的插入。IBVM基因除5’端前20位氨基酸有较大变异外，其他多处区域存在 点突变，表明IBVM基因存在不同程度的变异。 肽，lO株IBV分离株存在散在的点突变，没有碱基的缺失和插入，M、N基因同源性及系统 方向，SD07012N基因与所有测序毒株的氨基酸同源性小于90％，是一较大变异株。 关键词：IBV；M基因；N基因；同源性；正向重复序列 Molecular ofMandN ofInfectious Epidemiologygenes BronchitisVirusIsolatedinfour of China provinces Abstract Inthis study，infectious from farmsandhouseholdsin andAnhui were poultry iang collected． Zhej provinces Theninoculatedinto and ten—day—old 2-6，isolated SPF—embryonatedeggs passaged nine lesionsoftheinfected were and altogether．Thegross embryosdwarfing，curling infected allantoicfluidcouldnot 1％chicken haemorrhage．The directlyagglutinate IBVisolateswere identifiedRT-PCR． erythrocytes．Nine finally by ofM andN of IBVstrainsisolatedfrom Sequences gene