家蚕核型多角体毒在家蚕中的垂直传播及检测技术研究.pdfVIP

万方数据 摘 要 BmNPV 为双链DNA 病毒，属杆状病毒科、核型多角体病毒属，宿主主要 为家蚕。BmNPV 是家蚕的四大病毒型病原体之一，给养蚕业带来了巨大经济损 失。本研究以组织病理学分析和PCR 检测相结合的方法研究BmNPV 在家蚕中 垂直传播的可能性，感染亲本对F1 发病的影响以及PCR 法检测技术的可行性。 1. BmNPV 对添毒家蚕生殖器官感染情况的组织病理学分析 组织病理切片分析表明，添毒家蚕幼虫的初级精母细胞的细胞核和初级卵母 细胞的滋养细胞的细胞核中均可以观察到大量的被染成亮红色的BmNPV 颗粒， 表明在感染后期家蚕的生殖细胞已经被BmNPV 感染，使得垂直感染成为可能。 2. 亲本感染NPV 对产卵数、F1 代孵化率、F1 代幼虫发病率影响 添毒雌蛾(IF)交添毒雄蛾(IM)的产卵数、F1 代蚕卵孵化率，较正常雌蛾(HF) 交正常雄蛾(HM)的对照组下降达到极显著的水平，F1 代幼虫在一龄发病死亡率 为100%；添毒蛾与健康蛾正反交的两组的产卵数、F1 代蚕卵孵化率也均明显下 降，两个处理的F1 代幼虫在二龄末全部发病死亡。说明BmNPV 垂直传播可能 是影响产卵数及下一代孵化及幼虫发病的主要原因。 3. F1 代蚕卵NPV 的带毒分析及垂直传播的途径 通过PCR 检测发现，HF ×IM ，IF ×HM ，IF ×IM 三个实验组的F1 代蚕卵 在经过严格消毒后均检测到了BmNPV 的存在，表明BmNPV 可能通过感染的家 蚕亲本中携带病毒的雌雄生殖细胞由交配传染和经胚传染两种方式进行垂直传 播。 4.生产用种BmNPV 带毒率检测 对生产随机抽取的20 个批次的生产用种进行PCR 分析，有 16 个批次的蚕种可 以检测到BmNPV ，病毒的携带率高达80%；同批次的蚕种再次经过实验室消毒 处理后，有两个批次的蚕种检测到BmNPV ，其病毒携带率10%。说明生产用种 由于消毒不彻底或者经胚传染会有很高的BmNPV 携带率，生产上经常大规模爆 发BmNPV 病，除了饲养环境的因素，BmNPV 的垂直传播也是可能的诱因。 关键词：家蚕 BmNPV 垂直传播 PCR 检测 I 万方数据 Abstract Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV) has a single double-stranded circular DNA, belong to the family Baculoviridae , which are pathogenic for invertebrates, particularly insects of the order Lepidoptera. Its main host is Bombyx mori. BmNPV is one of the four virus diseases of silkworm, cause serious economic loss every year for sericulture. In order to clear venereal transmission of BmNPV in silkworm and the effection to next generation Histopathological and Polymerase chain reaction (PCR) technology were used to in this study..