猪圆环病毒1型ap蛋白的原核表达及pcv-1pcv-2抗体鉴别elisa的建立.pdfVIP

摘要 摘要 猪圆环病毒(Porcine 抗原性及核菅酸序列，将其分为PCV．1和PCV一2两型。PCV．1广泛存在于猪体内及猪源传代 细胞系中，经动物感染试验证明PCV．1无致病性，但与猪的健康密切相关，因此对该病原的 研究十分必要。PCV-2与猪群中发生的多种疾病相关，如断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮 炎肾病综合征、猪呼吸道疾病综合征及先天性震颤等，给全世界养猪业带来了巨大的经济损 失。 本试验通过设计合成特异性引物，扩增PCV一1 ORF2基因并进行原核表达，用所获得的 Cap重组蛋白经纯化后作为包被抗原建立了一种敏感、特异、稳定性好的间接ELISA方法。 根据GenBank公布的PCV．1 ORF2基因序列，设计并合成三对特异性引物，以PCV．1为模 基因定向克隆至原核表达载体pGEX．6P一1上，然后转入表达宿主菌BL21中，获得了目的蛋白， 分子量分别约为41Ku、40Ku、38Ku。通过Western b