中国长针线虫属要种群形态及分子系统学研究.pdf

摘要 长针线虫属(Longidorus 物根部，影响根系长势，甚至造成根部肿大或生长停滞等症状。属内的许多种(群体)还是 一些植物病毒的传播介体，对许多经济作物如花卉、蔬菜、农作物、果树等都造成严重的经 济损失，世界上许多国家和地区均将此类线虫列为检疫对象。长针线虫属内许多种群的形态 特征极为相似，并且不断有大量新种被描述，单纯依赖于形态学的分类鉴定方法困难而低效。 目前，关于长针线虫属的系统发育学研究和精确诊断体系的建立成为国际上研究的热点。本 研究在对我国12省市植物根围线虫样品调查的基础上，报道了我国长针线虫属主要种群的 形态学和rDNA分子特征，并基于所有应用于NCBI上长针线虫属rDNA分子序列，构建了 长针线虫属rDNA上4个不同区间的系统发育树，主要研究结果如下： 1．通过对我国浙江、北京、云南、河南、福建、湖南、山东、辽宁、山西、江苏、安徽 和广西等12省市植物根围2103份土壤样品的分离和鉴定，结合历史记录，结果表明：中国 大陆长针线虫属寄主范围共42属，均为多年生木本植物，在栽培作物中未检测到长针属线 虫。在检测结果中，河南长针线虫群体占检测到长针属线虫群体总数的26％，表明河南长针 线虫为我国长针线虫属的优势种群。 rDNA．ITSl区、rDNA．ITS2区、28SRNA基因中D2D3区和18SRNA基因的序列信 L．pisi RNA基因中D2D3区的序列信息和茶花长 息；首次报道了荔枝长针线虫rDNA．ITS区、28S 针线虫rDNA．ITS区、18SRNA基因的序列信息，丰富了长针线虫属鉴定的分子数据。 3．从国内河南、山西、浙江等地植物根围采得的土壤样品中分离得到12个含有较多个体 的河南长针线虫群体，发现其中两个群体具有完整的四个幼虫龄期，并进行了详细的形态学 观察和测量，其中有关该线虫的二龄幼虫数据为国际首次报道：对河南长针线虫代表性群体 的形态特征进行详细比较研究，完善该种的多岐检索表代码为：A34，B23，C34，D2，E3，F(2)3， RNA基因的D2D3 G(1)23，H12，11；同时对8个河南长针线虫群体相应的rDNA．ITS区、28S 区和l8S 8S 序列相似度为98．9％-99．9％，28SRNA基因中D2D3区序列相似度为99．3％99．9％，l RNA基因序列相似度为98．9％-99．3％，结果显示4个不同区间序列在河南长针线虫群体间 都较为保守；首次报道了河南长针线虫在浙江省的分布。 4．对茶花长针线虫雌虫和幼虫进行了形态学详细描述，确认茶花长针线虫仅有3个幼虫 龄期；首次报道了茶花长针线虫在中国湖南省的分布。 macromucronatus，三．pisi进行了详细地记述，其中厶pisi为中国大陆新纪录种。 6．根据形态学和分子特征等方面记述了长针线虫属一个新种。新种的模式生境为浙江临 B2C5D2E1 安柳杉和松树根围，在Chela等(1997)的形态学多岐检索表中的代码为A67 (27)F23G12H1 11。新种形态特征与荔枝长针线虫较为接近，但侧器囊形状和尾形存在 列相似度仅有13．9％，在较为保守的28S RNA基因中D2D3区序列相似度为90．1％。 7．通过对中国长针属不同种群测序并结合NCBI上长针线虫属rDNA分子序列，用贝叶 斯方法构建了基于18SRNA基因、rDNA．ITSl区、rDNA．ITS2区、28SRNA基因中D2D3 区序列特征的长针线虫属系统发育树。 虫(厶litchii) Abstract Needle a of nematodesthatnot ectoparasitic nematodes(Lo