原生质体融合创柑橘新材料及其遗传分析.pdfVIP

缩略词表 原生质体融合创造柑橘新材料 及其遗传分析 摘要 原生质体融合技术能有效克服柑橘有性杂交不亲合、性器官败育以及珠心胚干扰等 问题，足有性杂交的补充。体细胞杂种不仅可以实现核DNA重组，也可使胞质基因实 现重组，为遗传改良或创造雄性不育材料提供了一条捷径。本研究旨在根据我国柑橘品 种的遗传改良实际，有针对性地选配亲本组合，通过电场诱导开展利橘原生质体的对称 和非对称融合，以期将细胞质雄性不育基因转移到有籽品种中，也为柑橘砧木改良和培 育三倍体接穗品种提供可供选择的材料。主要研究结果如下： 1从建立胚性悬浮系入手，建立起国庆1号(Citrus 1’)、国庆5 unshiu‘GuoqingNo No 号((1 5’)等温州蜜柑品种原生质体培养的胚状体高频再生体系， unshiu’Guoqing 即首先采用两步法建立起质量好的胚性悬浮系，以获得足够数量状态好、活力强的原生 质体用于培养和融合；其次，在培养方法上采用低熔点琼脂糖包埋培养，分裂形成肉眼 可见细胞团时及时挑出，放入降压的液体MA上培养；第三，再生的愈伤组织在甘油培 养基上诱导出小胚状体后，及时转入液体乳糖培养基上振荡培养20一30d；最后将胚状 体转入幽体乳糖培养基上进一步增殖。 sour aurantium‘Goutou 2针对我国相橘砧木改良，对称融合获得了枸头橙(c orange‘)+枳壳(Poncirus护扣liata‘trifoliateorange’)组合的再生植株，获得了三种类 型共30余株植株，经形态学、细胞学、SSR鉴定均为四倍体体细胞杂种。CAPS分析表 束源于同 融合事件的体细胞杂种，相互间差异不大，单株间的相似系数为 09835—1 0000。再生植株移入田间2a后出现枯枝现象(26．7％)，可能是由于融合后不 亲和所致。 sinesis‘Newhallnavel 3对称融合获得了纽荷尔脐橙(C lansium‘Chickenheart sweet 双亲遗传物质的体细胞杂种，且三倍体的产生有可能是因为黄皮有一组染色体发生了丢 本。陔组合难以生根，嫁接在伏令夏橙上的成活率达80％，这些嫁接苗在田间初期生长 lr常，但生长垒一定高度后即出现落叶现象，最后发生整个植株死亡现象。 4开展了转移温洲蜜相CMS性状到有籽品种的研究。通过对称和非对称融合，获 得了国庆1号(C sinenSis unshiu‘GuoqingNo．1’)+439橘橙(C re“culata‘Ougan，×C 439’)、国庆I号(C ‘Gaitiangcheng“tangor unshiu‘GuoqingNo．1’)+沙田柚(Cgrandis ‘shatian No．1’) reticulata +冰糖橘(c pummelo’)、国庆1号(Cunshiu‘Guoqing 。bingtangtangerine’)、国庆5号(e Succosa tangerine’)、国庆l号(c No．1’)+四季橘(c ‘Huangyanbendizao