栽培马铃薯花培料筛选与花药培养研究.pdfVIP

摘要 花药培养在马铃薯遗传育种中具有重要意义，花药二单倍体不仅可以简化遗传分 析、提高育种选择效率，还可作为引进近缘二倍体野生种优良基因的桥梁。但在西南 地区，马铃薯花药培养鲜有成功报道。本试验系统进行了花培材料筛选及取材、消毒 与预处理、褐变控制、碳源、马铃薯提取液等因素对比试验，并研究了不同材料花药 培养表现及激素(组合)对马铃薯花药培养的影响。主要结果和结论如下t 1)4年5季现蕾、开花、结实情况考察结果表明：①在雅安条件下现蕾、开花 品种(系)比例都相当低，春季现蕾、开花品种(系)比例明显高于秋季。②不同品 种(系)间存在明显的现蕾、开花率差异，从117份材料中筛选到11份现蕾、开花 率高，春季现蕾开花稳定的材料作为花药培养基本材料。对供试材料进行了花器形态、 减数分裂和小孢子发育观察，结果表明：①可用花蕾与花药颜色、长度综合判定小孢 子发育时期。②材料、季节均在一定程度上影响花器形态与发育时期对应关系；③初 步确定了不同材料花药培养适期花蕾(药)主要形态特征。 2)对马铃薯花药培养的影响因素研究结果表明：①种植季节和取材时间对花药 培养特性有显著影响，气温可能是导致这类差异的重要因素；春季花药优于秋季，早 期花药比后期花药更适于花药培养。②70％酒精一升汞处理是花蕾外植体消毒的适宜 方法；升汞处理对花药具有明显毒害。③低温预处理效应不明显，高温预培养能够促 进花药愈伤组织形成。④AgN03处理能够降低褐化率、提高愈伤率，并且与材料无 关；PVP处理能够降低褐化率，但影响愈伤形成；转接处理导致花药褐化率升高、愈 伤诱导率降低。⑤蔗糖比乳糖更有利于花药愈伤组织形成，且与材料间不存在互作； 分析认为花药愈伤组织形成可能与糖代谢途径有关，且两者均存在基因型差异。⑥马 铃薯提取液对花药褐化和愈伤组织形成均具有显著影响，且不同来源(基因型)的提 取液也存在差异。 3)采用同一培养基对11份材料花药进行培养，结果表明：①材料间花药的褐化 率、褐化趋势、膨大率、愈伤率均存在显著差异。N5．09的愈伤率达7．17％，而有7 份材料未形成愈伤。②相关分析显示，早期花药褐化率与总花药愈伤率、膨大花药愈 伤率间呈显著负相关，可以作为花药力高低和花培材料筛选的早期选择指标。③通过 聚类分析可将供试材料归为3类，同一类的材料可能具有相似的花培力遗传基础，材 料间培养特性差异不显著；而不同类材料间培养特性达到显著、极显著水平。④N5．08、 N5．09、N5．10间培养特征总体相近，但材料与培养基间互作显著，表明花培力的遗 传基础可能相当复杂。 4)添加不同浓度、比例的生长素类、细胞分裂素类的培养基试验结果表明：① 培养基对花药褐化、愈伤形成效应均达到显著、极显著水平。②总体特征表现为：当 生长素类／细胞分裂素比例高时，有利于愈伤组织的形成，反之不利于愈伤组织的形 成。③愈伤诱导率最高的添加2．0 2，4．D+O．5 KT的培养基；降低2，4一D浓 mg／L mg／L 种基因型的愈伤诱导率均为0。④花药愈伤组织再生分化能力低，愈伤组织一不定芽 途径可能不是马铃薯花药培养植株再生的理想途径。 5)分析认为限制西南地区马铃薯花药培养的主要因素有：①光温生态条件限制 马铃薯现蕾、开花，也限制可用材料的生态类型；②花培力的遗传基础复杂，并可能 与生态(光温)反应遗传基础间存在不利关联；③花粉母细胞减数分裂异常，小孢子 培养再生潜力也低；④基于上述分析，雅安生态条件下能够开花的马铃薯材料对培养 条件的要求可能与文献报告条件差异较大，因而筛选更为困难。在上述分析基础上探 讨了在西南地区提供花药培养成功率的措施。 关键词：马铃薯花药培养二单倍体 Abstract Antherculturehascritical for researchand of significance breedingpotato genetic tuberosum is of the (Solanum L．)．Anther-derived