悬铃木再生体系建立及其遗传转化条件的初步研究.pdfVIP

摘要 摘要 悬铃木是著名的行道树和园林绿化树种，冠大荫浓，遮阴效果好，能够吸尘、 抗菌、净化空气，其木材也可用作建筑和家具。然而在美化城市环境的同时， 悬铃木球果破碎产生的果毛、雄花产生的花粉也给人们的生活带来了极大的危 害，悬铃木的果毛及花粉能够导致人们哮喘、皮肤过敏等疾病。为此，国内外 研究人员进行了大量的研究，以期解决悬铃木果毛污染问题。 基于此，本研究以悬铃木幼苗为外植体，进行悬铃木愈伤组织的诱导；以悬 铃木无菌苗叶片及茎段为外植体，进行悬铃木不定芽的诱导，建立了悬铃木再 生体系，同时，本研究系统分析了外植体选择、叶龄、激素类型等因素对悬铃 木愈伤诱导和不定芽再生的影响，然后对悬铃木遗传转化体系进行了初步研究， 为进一步构建悬铃木转基因系统奠定了基础。研究内容包括以下几个方面： 采用悬铃木幼苗，是进行愈伤组织诱导的最佳外植体。消毒外植体时，用 加O．1m。∥LIBA和0．1mg／LNAA，愈伤诱导率好，周期短。 采用悬铃木无菌苗茎段，是进行悬铃木不定芽诱导的最佳外植体。选择苗龄 为30．50d的无菌苗诱导效果最好；将外植体接种于培养基上先进行7d暗培养， 6-BA 有助于不定芽诱导；不定芽诱导时，选用MS附加O．1m∥LIBA、1．0mg／L KT，不定芽诱导率最高，丛芽长势最好。 和1．5mg／L 通过对影响悬铃木遗传转化因素的探讨，对悬铃木遗传转化条件进行了初步 的研究。对悬铃木幼苗整株浸染，用农杆菌菌液OD600为1．0浸染36h，并在共 培养时加入AS，GUS瞬时表达率最高，为18％；对悬铃木愈伤组织浸染时，用 最高，为62％。本实验初步确定了悬铃木遗传转化条件，这为后期获得转基因 悬铃木植株奠定了基础。 关键词：悬铃木；愈伤诱导；不定芽诱导；再生体系；遗传转化 Abstract Abstract ThePlatanusanotablestreettreeandan treeused spp．is importantlandscape for the urban hasthe crownand the environment，it shade，with improving big large effectfor and the woodCan perfect shady,dust proof air；its proof,noisepurifying alsobeusedasa and it the buildingfurniture．However,whentransfigurecity，its flossesfromfruitsand harm pollensspreadeverywhere，whichbroughtgreat to life．Thetrees withinflocculentor people’S plane producefloatingthings capiilaceous whichcancause todiseasessuchas researchers peo