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甜瓜离体雌核发诱导单倍体研究
摘要
摘 要
甜瓜是一种世界性的园艺作物,是一种杂交优势比较显著的瓜类蔬菜,但是,由于其自
交系的选育周期长、工作量大,严重制约着甜瓜杂种一代的育种进程。因此,减少优良自交
系的选育周期,可以大大提高甜瓜杂种一代的育种速度。通过未授粉子房离体培养途径和辐
射花粉授粉诱导雌核发育途径诱导甜瓜单倍体植株,再经染色体加倍迅速获得纯合的双单倍
体植株(double
h印loid)。利用上述技术手段,加快甜瓜优良自交系的选择,提高育种速度,
因此,探索单倍体发生途径具有着重要的理论意义和实践意义。
本试验以8个甜瓜杂种一代为试验材料,研究甜瓜未授粉子房离体培养试验过程中,子
房的发育时期、预培养方式、基因型、外源激素的添加、培养条件等主要因素,对启动雌核
发育和胚状体诱导的影响。研究通过调节其培养条件等提高诱导率,为甜瓜未授粉子房离体
培养诱导单倍体再生体系提供理论依据。试验以甜瓜杂种一代Ml、M6为试验材料,进行了
辐射花粉授粉诱导甜瓜单倍体试验,对辐射剂量、供体植株基因型等影响因素进行初步探索。
未授粉子房离体培养试验结果表明:外植体最佳取材时期为下午4.5点钟采集开花前一
天的子房;热激预处理最佳培养条件为30℃,黑暗预培养3d;启动雌核发育最佳培养基为
MS+0.04mg/LTDZ,添加309/L蔗糖,7.89/L琼脂,pH值5.8;在体细胞胚诱导过程中不需
要添加激素NAA,在添有6 2,4.D和2 6.BA的培养基上胚状体诱导率最高;2,4.D
mg/L mg/L
最佳作用时间为7d,因此,外植体在诱导培养基上培养7d后转接到不添加2,4.D的分化培
养基上:最适于启动雌核发育和胚状体诱导的基因型为甜瓜杂交种Ml。
辐射花粉授粉试验结果表明:辐射剂量为600Gy时诱导效果好于300Gy情况;甜瓜杂交
种M1更适合作为辐射花粉授粉诱导单倍体的试验材料:诱导培养基选定为基础MS培养基。
试验通过甜瓜杂交种M1在辐射剂量为600Gy诱导条件下获得4株再生植株,其诱导率极低,
仅为O.64%,经倍性鉴定其中有2株为单倍体植株,由此可见其单倍体诱导率仅为O.32%。
关键词甜瓜;未授粉子房;辐射花粉;离体培养;再生植株;单倍体
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Abstract
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