甜菜夜蛾抗药性其机理研究.pdfVIP

蔓里!型苤壅塑垫垫丝丝基塑型!壅 摘 要 exiguaHtlbneO是寄主广泛的夜蛾科害虫，主要危害蔬菜、棉花、 甜菜夜蛾(Spodoptera 大豆和紫花苜蓿等。在过去的几十年中，甜菜夜蛾的许多种群已对包括拟除虫菊酯在内的 许多药剂产生了抗药性，造成药剂防治失败。但人们对抗性机理却知之甚少，为此我们通 过抗性选育后的杂交，多次的回交、自交、选育获得甜菜夜蛾抗高效氯氟氰菊酯近等基因 系，并对其抗性机理进行了研究。 通过对甜菜夜蛾的人工饲料、饲养方法、饲养条件、继代饲养的生命参数、成虫补充 营养等研究，完善了甜菜夜蛾室内饲养方法，用该方法连续饲养甜菜夜蛾16代，种群未出 现退化现象。研究发现成虫使用糖加复合维生素液补充营养比单用水或糖水产卵量更高。 ，以室内连续饲养62代的甜菜夜蛾为实验种群，经过单对饲养和反汰选处理后，采用点 滴法、胃毒法和药膜法建立了甜菜夜蛾对各类药剂的相对敏感毒力基线，并与国内外敏感 品系进行了比较。监测了北京、廊坊、泰安、上海和广州的田间甜菜夜蛾抗性水平，结果 表明甜菜夜蛾E对除虫酰肼和溴虫腈等新开发的药剂之外的大部分常规药剂产生较高水平 抗性。／ 通过高效氯氟氰菊酯对甜菜夜蛾的抗药性选育和交互抗性研究表明，甜菜夜蛾对高效 氯氟氰菊酯抗药性发展速度较快，在停止用药情况下抗性退化缓慢。对高效氯氟氰菊酯产 生459．1倍的抗性种群对高效氯氰菊酯、氟虫腈和阿维菌索有高水平交互抗性，抗性倍数分 别为92．6、67．5和34．2；对灭多威和甲胺基阿维菌素中等水平交互抗性，抗性倍数为15．4 和7．6；对溴虫腈、虫酰肼和辛硫磷交互抗性倍数较低，分别为3．7、3．3和2．2。 f对甜菜夜蛾抗性遗传方式的研究结果表明，甜菜夜蛾对高效氯氟氰菊酯的抗性是常染 色体多基因遗传，主要基因为不完全显性。 将甜菜夜蛾抗性种群与敏感种群杂交、回交、自交、选育等多次重复过程，得到甜菜 夜蛾抗高效氯氟氰菊酯近等基因系。在获得抗高效氯氟氰菊酯近等基因系过程中抗性未衰 退，抗性基因未丢失。聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明近等基因系抗高效氯氟氰菊酯种群与 敏感种群酯酶谱带相近，而与父本抗性种群差别较大。这说明已将该抗性基因从影响抗性 表现的其他基因中分离出来，转移入敏感种群的遗传背景中。 通过对甜菜夜蛾敏感种群(ss)、近等基因系抗性种群(RILs-RR)主要生物学特性的研 究表明，不同抗高效氯氟氰菊酯基因型甜菜夜蛾适合度差异不明显。 抗性与敏感种群代谢酶及靶标酶研究表明。羧酸酯酶活力无差异，抗性种群的乙酰胆 碱酯酶和谷胱甘肽一S一转移酶比敏感种群的活性高，前者为后者的1．75和1．98倍，抗性种 群的细胞色素P450、细胞色素C还原酶和细胞色素b5分别是敏感种群的1．68，1．86和1．63 中国农业大学博士学位论文，2002 倍，表明甜菜夜蛾抗药性的形成与这些酶的变化有关。 在朱接触杀虫剂情况下，抗性与敏感种群甜菜夜蛾体内POD、CAT、SOD三酶活力无差 异，同一种群3龄和4龄之问也无差异。用高效氯氟氰菊酯LC5剂量处理幼虫时，以POD 变化最明显，CAT活力基本无变化。高效氯氟氰菊酯LCso剂量处理幼虫时，SOD、POD和 CAT的酶活力都显著增强。 比较了药剂穿透甜菜夜蛾抗性和敏感种群幼虫能力的差异，结果表明减少药剂的表皮 穿透是高效氯氟氰菊酯产生抗药性的机制之一。敏感种群用PBO预处理后，药剂对敏感试 虫的表皮穿透量无明显差异，但可以明显降低高效氯氟氰菊酯对抗性种群的LDso值和提高 药剂表皮穿透率。卜／ 测定了SS、NILs—RR和RR三种群不同龄期及药剂诱导后呼吸代谢的差异，发现甜菜夜 蛾幼虫呼吸强度都随龄期增加而增大，同一龄期不同种群幼虫的单位体重呼吸强度无显著 差异，表明抗药性未引起呼吸强度升高。药剂处理后的幼虫呼吸强度明显高于未用药处理 的幼虫。 用随机引物扩增的方法对近等基因系抗高效氯氟氰菊酯种群和敏感种群甜菜夜蛾进行 分析，引物$42和OPHl3在近等位基因系抗高效氯氟氰菊酯甜菜夜蛾中分别得到了1条特 异扩增带；引物OPH02在敏感种群中分别得到了l条特异扩增带，上述引物得到的扩增带， 带型较清晰、重复性较好。因此可以认为由$42和OPHl3两种引物得到的2条特异扩增带 是分别与甜菜夜蛾对高效氯氟氰菊酯抗性相关的基因片段。 关键词：甜菜夜蛾， 高效氯氟氰菊酯。