皱纹盘鲍脏器糖白分离纯化及其免疫活性的研究.pdfVIP

皱纹盘鲍脏器糖蛋白分离纯化及其免疫活性研究 摘要 皱纹盘鲍隶属于软体动物门、腹足纲，是我国主要的养殖鲍鱼品种。近年来， 随着杂交育种和北鲍南养技术的突破，皱纹盘鲍产量大增，但在皱纹盘鲍深加工 过程中，占其软组织重量30--40％的脏器经常被废弃，造成了资源浪费和环境污 染。已有研究发现皱纹盘鲍性腺多糖具有增强机体免疫、抑制肿瘤生长、抗氧化 等功能；皱纹盘鲍性腺甾醇类物质也具有显著的免疫调节功能和抗疲劳功效。但 皱纹盘鲍脏器糖蛋白方面的系统研究鲜有涉及。因此，本文以皱纹盘鲍脏器为研 究对象，对其中的糖蛋白进行系统的分离纯化研究，并考察其在免疫调节活性方 面的功能，旨在为皱纹盘鲍脏器综合加工利用提供基础理论依据。本文主要获得 以下研究结果： 1．皱纹盘鲍脏器营养成分分析表明：皱纹盘鲍脏器水分、蛋白及粗脂含量 较高，分别为湿重的74．6％、13．6％、5．1％，而总糖含量较低，为湿重的0．6％。 2．皱纹盘鲍脏器糖蛋白提取工艺的研究表明：在浸提液浓度0．2mol／L，料 液比l：9，超声处理时间为40min，超声波功率为300W的条件下，目标糖蛋白 得率为69．7mg／g。 3．皱纹盘鲍脏器糖蛋白分级纯化的研究表明，皱纹盘鲍脏器糖蛋白提取液 经硫酸铵沉淀，DEAE．Cellulous G．100柱层析、 52柱层析、Sephadex SephacrylS．300 组成均一的糖蛋白AGP．III，AGP。III含有总糖12．4％，总蛋白76．6％。 4．皱纹盘鲍脏器糖蛋白AGP—III的初步分析表明，AGP—III的单糖组成主要 有岩藻糖、半乳糖、氨基葡萄、甘露糖、氨基半乳糖、木糖、葡萄糖和鼠李糖。 AGP．III含有17氨基酸，其中以缬氨酸含量最高，其次为谷氨酸、甘氨酸、天门 冬氨酸。红外光谱表明AGP—III中存在糖和蛋白复合物的特征吸收峰和B折叠结 构、糖苷键类型为吡喃型。B一消去反应前后紫外扫描图谱的变化表明AGP—III有 o．糖肽键的存在。 5．皱纹盘鲍脏器糖蛋白对小鼠免疫调节作用的实验，通过连续皮下注射氢 化可的松建立小鼠免疫机能低下模型，以不同剂量的皱纹盘鲍脏器糖蛋白灌胃模 型小鼠，探讨了皱纹盘鲍脏器糖蛋白对小鼠免疫机能的调节作用。结果表明，皱 纹盘鲍脏器糖蛋白在一定程度上能提高免疫底Yd,鼠的脾指数，但不能逆转氢化 可的松引起的免疫器官萎缩；皱纹盘鲍脏器糖蛋白能显著提高免疫低下小鼠的细 胞免疫和非特异性免疫功能，尤其是中、高剂量组的作用效果显著。 6．AGP．III在一定浓度范围内对流感神经氨酸酶活性有一定抑制作用。 关键词：皱纹盘鲍脏器：糖蛋白：分离纯化：免疫活性 onExtracti ri f Study on．Pui cati onandI mmuneacti Vi ty ofGI i n fromAbaI ycoprote oneVi sceral Abstract Haliotisdiscushannai of of an Ino，aspecies GastropodaMollusks，isimportant resourcein the fishery China．Recently，with ofabalone and developmentaquaculture the of ofabaloneabout exploitationdeepprocessingproducts，the by-product 30％-40％inwas