益生芽孢杆菌的变选育及酶学特性.pdf

摘要 本文对益生菌株的筛选与鉴定、诱变选育、酶学特性及益生效果进行了研 究，得出主要结果如下： (1)依据酶活和胃肠耐受性，分别从土壤和健康鸡肠道中分离纯化得到纤 l和蛋白酶产生菌JCl2。其中B 维素酶产生菌B 1菌株的CMC酶活和FPA酶 U／mL和0．228 活分别达到0．256 U／mL，且可以耐受pHl．5和0．3％的胆盐浓度。 结合B1菌株的生理生化特征和16SrDNA序列分析，鉴定其为蜡样芽孢杆菌 U／mL，具有良好的胃肠耐受性。 (Bacilluscereus)。菌株JCl2的蛋白酶活为519 根据生理生化特征，鉴定JCl2菌株也为蜡样芽孢杆菌。 l、JCl2菌株，获得突变株B1—1和 (2)利用微波一硫酸二乙酯复合诱变B U／mL， JCl28。B1．1菌株的CMC酶活达到0。373U／mL，FPA酶活达到0．348 U／mL，较出发菌株提高了l。33倍。两突变株均具有遗传稳定性，胃肠耐受性 均较强。 5．0，37℃ (3)B1．1菌株最佳产酶条件为20g／L麦芽糖，2．5g／L硫酸铵，pH 下培养36h。JCl28菌株产蛋白酶的最适发酵条件是：以6％麦芽糖作碳源，3％ 7．0。该蛋白酶的最适作用温度为65℃， 豆饼粉作氮源，发酵温度37℃，起始pH mmol／L 最适pH为值7．0，具有良好的热稳定性和pH稳定性。1 Fe”可显著提 黄色葡萄球菌和致病性大肠杆菌的抑菌效果明显。 同的促生长作用，且混合菌株能够显著提高小鼠的生长性能。小鼠饲喂B1—1 4 和JCl28菌株1d后，测定小鼠肠道内酶活力大小，结果表明，B1—1菌株具 有蛋白酶活性，JCl28菌株具有纤维素酶活性，并且B1—1和JCl28菌株混合饲 喂的效果更好。与对照组相比，CMC酶活、FPA酶活和蛋白酶活分别提高了 48．70％、30．15％和30．23％。小鼠的胸腺和脾脏指数均有所提高，其中混合饲喂 组小鼠的胸腺指数显著高于其他试验组(P0．01)。 关键词：益生菌；蜡样芽孢杆菌；纤维素酶；蛋白酶；选育；酶学特性 ABSTRACT Inthis researchedonisolationand paper，we identification，mutation breeding， enzyme andeffectof ofBacillusas mainresults properties probiotics probiotics．The were asfollows： Bl 1 withcellulase andJC2strainwith (1)Strain activity proteinase activity werescreenedfromsoiland broiler’Sintestines