稻瘟病菌mgag9基因的克隆与功能分析.pdf

摘 要 grisea)能引起水稻上的一种重要病害．稻瘟病，了 稻瘟病菌(Magnaporthe 解其致病过程和机理对于防治稻瘟病菌有重要作用。近年研究表明细胞自噬可能 参与了稻瘟病菌侵染水稻过程中分生孢子体死亡的过程。细胞自噬是细胞中一种 物质降解方式，在一些特定情况下，自噬被诱导，一些长寿蛋白质和细胞器被运 送到液泡／溶酶体中被降解，从而能量和物质得以重新利用。此过程在许多生物 体中是保守的，一些参与过程的基因也是保守的。稻瘟病菌中存在与啤酒酵母自 失突变子表型与野生型存在很大差异。本文则分离和克隆了ScATG9在稻瘟病菌 中的同源基因MgATG9，通过基因敲除的方法初步分析了MgATG9在致病及相 关过程中的作用。研究结果如下： 1．利用ScATG9基因预测的氨基酸序列在稻瘟病菌基因组数据库中检索序 列相似的基因，定名为MgATG9。 8aa。 2．PCR扩增获得cDNA克隆。测序分析CDS长2754nt，编码91 4．基因MgATG9缺失后，细胞自噬过程中断，在液泡中未见自噬泡的积累。 5．突变子在CM培养基上生长时菌丝稀疏，产孢量显著下降。 6． 突变子分生孢子发育受到影响。 7．突变子附着胞膨压显著下降。 8． 突变子致病性几乎完全丧失，在水稻和大麦叶片上不能形成可见病斑： 在有伤口的大麦叶片上只能产生微弱的病斑。 9． 突变子在OMA培养基上与2539菌株交配，产生子囊壳时间推迟并且数 量明显减少，育性受到影响。 关键词：稻瘟病菌；细胞自噬；MgATG9；发育；致病性 Vl Abstract well-knownastheefficientand grisea(Hebert)Barr,is devastating Magnaporthe ofriceblast．A ofthemolecular ofthis agent deepunderstanding backgroundfungus iSbeneficialforthecontrolofriceblast．Evermore molecular powerful genetic ofthericeblast toa ofthe brings understanding analysis fungus comprehensive inriceblast．Blastisthus asa molecularbasisof interactions developed host-pathogen betweenan model forthe ofinteractions economicallyimportantcrop system study anda plant damagingfungalpathogen． Recentresearchdemonstratedtheinvolvementof withinthe autophagy process ofthecelldeathoftheconidiumthe