油菜抗菌核病分机制研究.pdf

摘 要 由核盘菌($clertiniasclerotJoram(Lib．)deBary)引起的菌核病是油菜的一种最主要 的病害。目前高抗材料缺乏、油菜抗菌核病的分子机制尚不清楚，尚未找到关键的抗病基因。目 前世界各国的研究者以拟南芥等模式植物为对象，已经构建了植物病害防御反应的信号传导网络 或分子机制，这个网络主要由氧爆发(oB)途径、水杨酸途径和茉莉酸途径所构成，其中氧爆发 途径，包括H202的产生是植物防御反应的一个早期事件。 酸类似物)和菌核病毒素草酸(oA)对油菜的诱导抗性表型及H舡含量，然后以这些处理及菌核 F_§Ts数据 病接种处理为材料，构建cDNA文库，进行较大规模的EsTs测序，并从归并的Unique 库中选择已知的病害防御反应途径标记(marker)基因，进行表达分析，在此基础上，以拟南芥 防御信号传导网络为依据，首次推导构建了油菜对菌核病的防御反应分子网络，最后以产H如的 草酸氧化酶和葡萄糖氧化酶转基因为材料研究验证了H202在防御反应或抗病反应中的作用。 ． blue染色结果显示，菌丝在化学物质处理叶片中的生长都受 导了油菜对菌核病的抗性。Trypan ． oA能诱导油菜产生对菌核病的抗性，112如在抗病反应中起着重要作用。 和CHI等几个病程相关蛋白基因在化学物质及接菌处理油菜中的时序表达结果显示，化学处理和 病原接菌都能诱导这些基因的上调表达，这些基因在核盘菌接菌油菜中的表达规律与草酸处理中 相似，这些结果表明油菜抗菌核病的分子机制与三条防御信号传导途径有关，抗病反应可以通过 地02诱发氧爆发途径，进而激活茉莉酸途径和水杨酸途径来实现。 为系统研究油菜抗菌核病分子机制，本研究以MeJA、BTH、OA及S FASTs进行分析。大量的抗病基因 油菜为材料构建了cDNA文库，并对文库中9053个Unique 核病反应中起着重要调控作用。找到620个防御反应相关的基因，他们可能在油菜抗菌核病反应 EsTs数据库的分析推测了油菜抗菌核病的信号传导网络。 化酶(Go)的转基因油菜进行了抗菌核病机理研究。转OXO油菜对菌核病及草酸的抗性都有显著提 高，而且通过对草酸的降解抑制了草酸处理造成的pH下降，H如含量也升高，上述几个防御反应 途径的标记基因的表达也被激活。转印油菜抗病性增强，H2倪、SA含量也升高，上述几个防御反 应途径的标记基因的表达也被激活。表明两种转基因油菜通过产生的Hz晚诱导了水杨酸介导的和 茉莉酸介导的信号传导途径，从而引起油菜对菌核病的抗性。 关键词 ESTs数据库，过氧化氢 油菜，菌核病，抗病机制，Unique Abstract SclerotiniaSclerotiorumisoneofthe most diseasesofoilseed inlnlune devastating rape．The materials havenotbeen molecularmechanismsofresistancetosclerotiorumin found，the oilseed rape alenotclear the ofdiseaseresistancehavenotbeenfound．At defense yet,andkeygenes