水稻矮秆基因d2和光叶基因gl1的图位克隆及功能研究.pdfVIP

摘要 摘要 植株矮化是农作物育种实践中最重要的农艺性状之一。农业生产上第一次“绿 色革命”就是利用矮化植株来培育抗倒伏农作物新品种，从而大幅度提高了世界粮 食产量。在水稻中，目前已报道的矮秆或半矮秆突变体(基因)超过60个。导致植 物矮化的原因很多，有赤霉素(GA)影响、油菜素内脂(BR)影响、细胞壁异常、 细胞延伸异常等，但目前研究最为深入的是GA和BR对株高影响。GA调控着植物 生长发育的几乎所有过程，包括种子萌发、茎干伸长、叶片扩展、表皮毛发育、花 和果实发育，以及发育时期转换等，是植物生长发育最重要的调节剂。本研究利用 源于籼稻模式品种93．11经1，．射线诱变产生的矮秆突变体(暂时命名为d62 (dwarf62))，开展了表型和生理研究以及基因图位克隆与功能分析。研究结果表明 D62基因与GA代谢途径相关，并调控植株生长发育的多个性状。主要研究结果如 下： 1．正常生长条件下，彩2突变体表现出多个异常表型，其中包括植株矮化、叶· 片变宽、叶色深绿等水稻GA相关突变体的特征。 2．生理学分析表明，d62突变体植株内源GAl的含量明显降低，GA诱导的无胚 半粒米粒产生倪一淀粉酶的活性明显减弱。 3．遗传分析表明，d62突变表型是由单隐性核基因突变引起的；D62基因被初定 蛋白，被认为是D62最佳侯选基因；基因组和cDNA测序结果均表明在d62突变体中该 候选基因的ORF区发生两个碱基(GC)缺失造成移码突变；转基因功能互补验证表 明将D62基因导入到棚突变体中能回复其突变表型。 4．D62基因编码的蛋白为617个氨基酸，其序列具有GRAS家族蛋白的典型特征。 蛋白是OA信号传导的抑制因子，SCR蛋白调控植物细胞的非对称分裂。 水稻矮秆基因d62和光叶基N gll的图位克隆及功能研究 中均表达，但在根中的表达量稍低。 6．RT-PCR分析和Real．timePCR分析结果表明，在d62突变植株中，GA代谢相 进一步表明D卯参与GA代谢相关途径。 本研究还对水稻光叶突变体基因GLl进行了研究。在水稻中，光叶光壳(简称光 叶)是一个有益的农艺性状， 其有利于收获及后续加工，进而也被利用在水稻育种 实践中。光叶基因很早就已被命名为∥J『，并初定位到水稻5号染色体短臂，但∥』基 因未被精细定位和克隆。本研究对源于籼稻模式品种93．11经丫．射线诱变M2群体的光 叶突变体∥．『进行了形态学分析、基因精细定位和突变位点分析等研究，主要研究结 果如下： 1．形态学和扫描电镜分析表明，导致光叶表型的主要原因是叶片表面的 表皮毛的缺失。 2．遗传分析表明∥J突变是单隐性核基因突变；∥J『基因被初步定位在水稻5号染 位结果与先前对光叶稻中∥J基因的定位结果一致。在∥_『初定位的基础上开发了12个 个推定基因。 · 3．测序结果表明4个∥-突变体(∥，．．『、∥J『一2、∥，一了和∥J『一彳)和4个美国光叶稻 发生了一个相同的点突变(A_T)。 关键词：水稻、d62、∥J、突变体、基因定位、图位克隆。 Abstract Abstract Dwarfismoneofthemost is traitsin becausedwarf importantagronomiccrop breeding cultivarsaremoreresistantto the lodging．Duringfamous“green was to architecturewhich increasedthe adoptedimprovecrop