野生苦豆子种质源的遗传多样性研究.pdfVIP

摘 要 本研究以宁夏、甘肃、青海、新疆和内蒙的 22 个苦豆子居群为材料，通过种子形态特征、 发芽特性和 RAPD 、ISSR 分子标记探讨不同苦豆子种质资源的遗传多样性，分析其种质资源之间 的亲缘关系，旨在了解其遗传背景，为科学合理地利用苦豆子资源、驯化、引种、栽培等工作提 供一定的理论依据。研究结果如下： （1）对 22 个苦豆子居群的种子形态、大小、千粒重和发芽特性等性状进行调查。结果表明 苦豆子种子最大的是 4.75 mm × 3.50 mm ，最小的是 3.80 mm × 2.90 mm，千粒重为 15—26 g ；对 8 个具有代表性居群种子活力的研究表明，以 No.103 和 No.122 居群的苦豆子种子活力最高，其 发芽指数分别为 36.51、36.24，活力指数为 1323.49、1274.56。除种子大小这一性状外，其余性 状的变异系数都超过 10 %，表明不同居群的苦豆子间具有一定差异。 （2 ）建立并优化了适合于苦豆子遗传多样性分析的ISSR 反应体系。确立 ISSR 最佳反应体系 为：10 × Buffer 2 μl，Mg2+ 6 mM/L， DNA 10 ng ，Primer 30 μM/L ，dNTP 1.0 mM/L，Taq 酶 2.0 U ， 加 ddH2O 至 20 μl 。 （3 ）从 300 个 RAPD 引物中筛选出重复性好且扩增条带清晰的引物 31 个。其中多态性位点 百分率为 90.76 %，Nei’s 遗传多样性指数和 Shannon 信息指数分别为 0.3015、0.4531，遗传距离 变幅范围为 0.1142—0.7091 。RAPD 的UPGMA 聚类分析与主成分分析结果表明，22 个苦豆子居 群聚为 6 类，苦豆子居群间出现了一定的遗传分化。 （4 ）从 150 个 ISSR 引物中筛选出重复性好且扩增条带清晰的引物 51 个。其中多态性位点百 分率为 93.30 %，Nei’s 遗传多样性指数和 Shannon 信息指数分别为 0.3351、0.4998，遗传距离变 幅范围为 0.1736—0.6502 。ISSR 的 UPGMA 聚类分析结果表明，22 个苦豆子居群聚为 6 类，苦 豆子居群间出现了一定的遗传分化。 （5 ）RAPD 和 ISSR 分子标记遗传多样性分析结果表明，ISSR 分子标记的遗传多样性参数均 比 RAPD 的高，表明 ISSR 标记比 RAPD 标记检测的遗传多样性能力更好。两种分子标记对 22 份苦豆子种质资源的聚类结果基本一致。其遗传距离和相似系数的相关性分析表明，相关系数为 0.6681，且达到极显著水平。 关键词：苦豆子，种质资源，RAPD ，ISSR ，遗传多样性 I Abstract Based on 22 Sophora alopecuroides L. germplasm resources from Ningxia, Gansu, Qinghai, Xinjiang and Inner Mongolian in China, this thesis studies genetic diversity and genetic relationship by marking seed morphology, characteristics of seed germination, RAPD and ISSR molecular markers. The purpose was to learn about their genetic background and provide some theoretical evidence for scientifically utilization of S. alopecuroides L. resources, and its domestication, introduction, cultivation and for others. The results were as follows: (1)