螺虫乙酯对大鼠生理影响及其体内分布检测方法的建立.pdf

摘要 摘 要 农药是一把双刃剑，在为农业增产增收做出贡献的同时，也带来了一些不可抗拒的负面 效应。扩散、残留、富集是化学农药不可避免的环境行为。化学农药残留物随着大气和水的 运动做长距离迁移，从一种环境介质扩散到另一种环境介质，并且可通过食物链影响到远距的 人和其它动物。农药不仅通过食品、水和空气威胁着人类健康，而且对鸟类、兽类和其它一 些高等动物均有一定程度的间接影响，这种影响主要是通过食物链富集和从环境中吸收造成 的。目前，已经进行了多类农药在两栖类、鱼类以及哺乳动物体内的毒理研究。三唑类、酰 胺类、沙蚕毒素类、拟除虫菊酯(溴氟菊酯、氟氰菊酯、氯菊酯等)等已有较为透彻研究， 但关于季酮酸类化合物研究较少，本文根据这一现状进行了螺虫乙酯对大鼠的生理影响及 其体内残留与分布的研究。 1．在螺虫乙酯分析方法研究中，对UPLC-l订S／MS各项参数进行了优化，显著缩短检测时 间。选择0．1％甲酸水溶液．乙腈为流动相，梯度洗脱的进样方式。流动相中加入甲酸显著提高 了质子化效率，并通过调整流速和梯度洗脱等条件，实现了目标峰和干扰峰的良好分离并使 峰形得到改善。每个样品的分析时间仅需5min，节省了分析时间和试剂消耗量。在质谱调谐 中，采用流动注射泵连续进样，以全扫描模式确定采用多离子反应检测模式检测(MRM)确 定螺虫乙酯的m／z374．0／216．0为定量离子对，m／z374．0／302．0为定性离子对。 2．应用UPLC-Ms／MS法建立了螺虫乙酯的残留检测方法，分别对大鼠脂肪、肌肉及脏器 进行分析，采用乙腈做为提取溶剂。螺虫乙酯回收率在81．6％～103．5％之间，相对标准偏差 在4．6％-8．9％之间，最低检测浓度为0．005 mg／kg，最小检出量为1．2×10。139。 3．螺虫乙酯攻击大鼠的主要部位为肝脏、肾脏等解毒、排毒器官，且各器官螺虫乙酯残 留量与浓度有密切关系，当给药浓度为2倍关系时，检测残留量也呈现出近似于2倍。 4．螺虫乙酯对酸性磷酸酯酶的酶活力无显著影响。离体条件下，随着螺虫乙酯浓度的增 酯50 d后，酶活性为对照的1．26倍。加大给药剂量为100 mg／kg／d给药7 mg／kg／d后，酶活 d时，酶活力 力升高为1．48倍。在停止给药后7d，酶活力分别降低至1．22倍和1．42倍。14 分别降低至1．16倍和1．36倍。 5．螺虫乙酯对碱性磷酸酯酶的酶活力无显著影响。螺虫乙酯对碱性磷酸酯酶的酶活力有 抑制作用。离体条件下，随着螺虫乙酯浓度的增大酶活力减弱，且呈线性关系 (Y_=3×10～X2．0．0044X+0．9743，R2=0．9449)。活体培养条件下，给药7d后螺虫乙酯50 mg／kg ／d处理酶活性为对照的0．94倍，加大给药剂量为100 mg／kg／d后酶活力降低0．86倍：在停止 给药后7d，酶活力分别升高至O．96倍和0．89倍；14d时酶活力分别升高至0．97倍和O．9l 倍。 6．螺虫乙酯对羧酸酯酶的酶活力无显著影响。离体条件下，随着螺虫乙酯浓度的增人羧 酸酯酶活力减弱，且羧酸酯酶的酶活力与螺虫乙酯浓度呈线性关系 东北农业大学农学硕上学位论文 (Y--．0．0013X+O．9639，R2=O．9532)。活体培养条件下，在给药7d后螺虫乙酯50 mg／kg／d处理 酶活性为对照的0．93倍，加大给药剂量为100 mg／kg／d后酶活力降低为0．87倍；在停止给药 后7d，酶活力分别升高至0．96倍和0．90倍；14d时酶活力分别升高至0．97倍和O．96倍。