细粒棘球蚴eg5基因的克隆、原核表达及抗体制备.pdfVIP

细粒棘球蚴Eggs基因的克隆、原核表达及抗体制备 摘 要 囊型包虫病是由细粒棘球绦虫的续绦期幼虫寄生在宿主的肝、肺等脏器引 起的一种严重危害健康的人畜共患寄生虫病，该瘸严重影响了我国乃至全世界 人类的健康以及畜牧业的发展。囊犁包虫病的防治主要是依靠分子疫苗，E99．， 基因被公认的目前细粒棘球绦虫所有抗原基因中最有前途的疫苗候选基因。 E99S疫苗通过在六钩蚴表面表达的抗原与抗体和补体一起介导包囊发生溶解 而产生保护作用，对囊型包虫病的防治意义重大。由于来自不同地域、不同宿 主的坛存在着差异，出于E995疫苗的安全性和有效性的考虑，更为安全和有 效的E995新疫苗的研发具有十分重要的意义。 本文利用PCR的方法，扩增得到细粒棘球绦虫青海株印夕5的全长基因， 测序表明该基因序列全长为1262bp，由3个外显子，2个内含子组成，3个外 码156个氨基酸。我们测定的E99S基因序列与以前报道的青海株、澳大利亚 株和美国株的E995基因序列比较表明，总共只有41个碱基存在差异，其中36 处发生在内含子部分，只有5处是发生在外显子部分。在氨基酸水平上，它们 之间只有2个氨基酸的差异。 的融合蛋白。用表达的融合蛋白免疫家兔，获得了兔抗e995抗体。ELISA表明 该抗体的有效效价约为l：1600，为以后进一步大规模制备e995抗体建立了基 础。 关键词：囊型包虫病 细粒棘球绦虫 克隆 原核表达 抗体制备 and Cloning，RecombinantExpression Antibody J1 “1n■‘ of Uene PreparationE99S granulosus Abstract a and diseaseharmfultothehealthof Cysticechinococcosis(CE)iSparasitic humanandlivestock．CEiscausedthemetacestodelarvalofEchinococcus by it intheliverand ofhost．Thisdisease granulosus(Eg)whenparasitizes lung affectsthe ofhumanhealth acutely and inChinaandevenall development graziery overthe to CE world．Now,theimportantway isthe of prevent application molecular is astheeffectivevaccinecandidate vaccine．E995generegarded gene． Becausethe onthesurfaceof cancoordinatewith antigenexpressed oncosphere and