细胞壁在植物耐和铝毒害机制中的作用.pdfVIP

摘要 摘要 铝毒是酸性土壤上限制作物产量的关键因子之一。虽然有机酸分泌是公认的 铝排斥机制，但越来越多的证据表明细胞壁在植物耐铝性上起重要作用。铝毒害 的最初反应是抑制植物根系伸长，但其作用机制还不明确。本文首先研究了细胞 壁在荞麦抗铝毒上的作用；在研究有机酸与细胞壁相互作用的基础上，提出了有 机酸解铝毒的新的作用机制；为了进一步明确铝抑制根系伸长机理，利用果胶单 克隆抗体，研究了铝处理对玉米根尖果胶分布和细胞壁属性的影响；最后还利用 拟南芥根尖细胞特异报告基因，研究了铝处理对根尖不同组织细胞的影响。得到 以下主要结果： 1．细胞壁在荞麦耐铝性上的作用 通过对4种耐铝性不同的荞麦品种的研究发现，其耐铝性的差异是与外部排 斥机理相关，但机酸分泌不能完全解释这一差异。进一步研究发现在无铝条件下， 耐性品种根尖果胶含量低于敏感品种，而铝处理提高所有品种的果胶含量，且根 尖果胶含量与铝含量呈显著的线性关系。利用果胶单克隆抗体，发现耐性品种 ／iangxi具有较少的低度甲酯化果胶和较多的高度甲酯化果胶，且耐性品种 Jiangxi果胶甲酯酶活性低于敏感品种Shanxi。在水稻中也有类似的现象，说明 无论能否进行有机酸分泌，细胞壁果胶甲酯化程度均与耐铝性有关。细胞壁吸附 铝的动力学研究表明，敏感品种细胞壁能吸附更多的铝，且铝与之结合更加紧密。 以上结果表明荞麦幼苗耐铝性是与根尖细胞壁果胶含量，果胶甲酯酶活性、果胶 甲酯化程度及细胞壁对铝的吸附能力有关。 2．有机酸分泌能保护细胞壁与铝结合位点 铝诱导植物根尖有机酸分泌被认为是最重要的耐铝机制之一。一般认为，根 尖分泌的有机酸通过螯合根际土壤溶液中的铝而发挥其耐铝作用，然而对于根系 分泌的有机酸是否足够清除植物根系周围介质中的铝还存在争议。小麦、决明和 荞麦根尖铝处理后分别分泌苹果酸、柠檬酸和草酸。本文中，在相对根系伸长抑 0、20和50“M， 制率在35％的条件下，小麦、决明和荞麦的铝处理浓度分别为1 2 fllll01cm 12h～。当加入外源有 而此时它们有机酸分泌量分别为15、20和21 机酸来减缓铝毒时，要想达到相同的解毒效果，苹果酸和草酸的加入量分别是柠 摘要 檬酸的8倍和2倍。按照此比例计算，苹果酸：柠檬酸：草酸的比例应为4：1： 5，这与实际分泌量有很大的差异。因此，单从有机酸与铝螯合角度不能解释其 在解铝毒上的差异，我们认为有机酸还有其他解铝毒机制存在。用lmM苹果酸、 柠檬酸和草酸预处理细胞壁后，均能显著降低其对铝的吸附量，且三种有机酸之 间没有差异。这些结果表明，分泌的有机酸能通过减少细胞壁与铝的结合位点而 起到耐铝作用。 3．果胶半乳聚糖分布紊乱与铝抑制玉米根系伸长相关 铝毒害的最初反应是抑制植物根系伸长，然而其作用机制还不明确。本文中 我们运用果胶单克隆抗体(JIM5和JIM7)，研究铝处理对细胞壁果胶多糖的影响。 在无铝条件下，JIM5定位的果胶多糖同聚半乳糖(HG)在整个细胞壁都有分布， 但是在胞间隙分布最多。而JIM7定位的HG均匀地分布在整个细胞壁周围。50uM Al处理3,,ix时后，玉米根系伸长被抑制了10％，此时只有胞间隙有荧光显示。当 根系伸长抑制率在50％的情况下，这两种抗体都只在胞间隙有表达，荧光强度变 弱，而且不均匀分布。用La处理达到相同的根系伸长抑制率后，果胶抗体的分布 也有类似的变化。说明HG的这种分布变化与根系伸长抑制具有很好的相关性。用 柠檬酸洗脱根尖吸附的铝后，果胶抗体的这种分布形式不受影响。因此，我们认 为铝诱导引起的HG分布紊乱是铝抑制根系伸长的机理之一。 4．铝对拟南芥根尖特异报告基因表达的影响 根系生长受到抑制是铝毒的原初响应，但对铝毒对根尖不同细胞的影响尚没 有报道。本研究中我们利用拟南芥不同根尖细胞和生长素报告基因，以其说明铝 对根尖不同细胞及生长素分布的影响。GAL4-GFP增强子捕获株系J3411能在根 冠柱细胞和侧根冠特异表达，铝处理后发现其在根冠柱细胞的表达降低，侧根冠 表达不受影响，说明根冠柱细胞的功能受到损害，这