蟹类过敏原的blbc小鼠模型研究.pdfVIP

蟹类过敏原的BALB／c小鼠模型研究 摘 要 TM)是甲壳类主要过敏原，近年的研究发现精氨酸激酶(Arginine 类过敏原，但其是否为蟹类特异性过敏原至今仍没有证实，而动物模型能直接模拟过敏的 过程及症状，因此本文通过动物模型对蟹类过敏原(TM、AK)的致敏性进行评价，以期 为其致敏机制的研究以及低致敏性食品、变应原的安全性和有效性检验研究提供途径。 本研究通过等电点沉淀、硫酸铵盐析、加热处理等方法纯化锯缘青蟹TM，经兔抗中 注射的方式建立AK的BALB／c小鼠模型。通过模型的过敏症状得分评价，粪便组胺检测， linkedimmunosorbent 间接酶联免疫吸附试验(Enzyme time 抗夹心ELISA检测过敏原体外刺激淋巴细胞因子，实时聚合酶链式反应(Real chain mRNA相对表达量等，对锯缘青蟹TM和 reaction，RT-PCR)检测IL．4 polymerase AK进行致敏性评价。 本研究纯化锯缘青蟹TM的分子量和等电点分别为38kDa和4．5。TM的小鼠模型研 究结果显示，腹腔注射和灌胃方式敏化处理的所有小鼠都出现不同程度的过敏症状，而IgE 3、IFN一九水平分别为 水平前者是后者的3倍。腹腔注射方式的淋巴细胞因子IL．4、IL．1 24．278+1．985 nM； pg／mL、27．7764-0．0345pg／mL、84．243+0．0365pg／mL，组胺为6342．68 灌胃方式分别为17．508+2．189 pg／mL、3．1504-0．434pg／mL、15．0564-1．974 mRNA的相对表达量TM 说明两种方式都是可行的，其中腹腔注射方式的效果更好。IL．4 本研究纯化锯缘青蟹AK的分子量和等电点分别为40kDa和6．5。与生理盐水作为阴 性对照的结果相比，AK和阳性对照OVA的小鼠模型研究结果显示，腹腔注射方式敏化处 IFN一九分别为25．8594-0．072164-0．745 14．2654-8．220 pg／mL、22．7 pg／mL、l pg／mL，组胺为 6188．3572riM；OVA组的分别为19．2234-0．988 pg／mL、17．2924-2．831 pg／mL和6175．489 和OVA组之间都没有显著差异(p0．05)。IL．4 组为1．98，二者之间没有显著差异(p0．05)。 本研究分别通过腹腔注射、灌胃方式成功地建立了锯缘青蟹TM的BALB／e小鼠模型， 结果表明腹腔注射方式的效果更好；在此基础上，通过腹腔注射方式首次建立BALB／e小 鼠模型对锯缘青蟹AK的致敏性进行评价，结果证实AK确为锯缘青蟹特异性过敏原。此 外，本研究建立蟹类过敏原小鼠模型可望为开展甲壳类过敏症的分子机制，以及低致敏性 食品、变应原的安全性和有效性检验研究等提供技术基础。 关键词：锯缘青蟹，过敏原，原肌球蛋白，精氨酸激酶，动物模型，BALB／c小鼠 lI ofcrab inBALB／cmicemodel Study allergen Abstract Shellfish is themostcommonfood indicatethat