亚洲百合组织培与其形态发生途径的研究.pdfVIP

亚洲百合组织培养 与其形态发生途径的研究 ’ ◇ p ． 摘要 本实验以亚洲系列百合mimlla的鳞片、花器官与无菌苗叶片为 外植体，建立起了它们的无性繁殖系。同时结合石蜡制片法观察和比 较不同外植体在组织培养中的形态发生途径，并且对其发生条件、发 生过程、细胞启动位置等做了研究，找出了该品种不同外植体在离体 培养中最佳的培养基和培养方法以及了解了该品种在形态建成过程 中的细胞变化历程与特征。获得了如下主要研究结果： (1)鳞片不同部位对诱导形成芽的能力反应顺序为下部中部 上部。激素配比试验表明鳞片在BA与NAA配合使用的培养基中的诱 导效果要优于单独使用BA的诱导效果，而2，4一D的诱导效果最差； mg／L。 鳞片在初代培养中的最适培养基是MS+BA3．Omg／L-FNAAO．2 显微观察发现鳞片在培养后近轴面表皮细胞以内的第一层薄壁细胞 首先脱分化，然后是表皮细胞和第一层薄壁细胞以内的几层细胞，启 动位置逐渐向内恢复分裂能力，属于多细胞起源。培养自始至终鳞片 远轴面的细胞均保持未启动的特征。器官分化主要有三种方式：由愈 伤组织形成不定芽；由愈伤组织形成不定根；由愈伤组织形成不定芽 的同时形成不定根。不定芽起源于愈伤组织较表层细胞，是外起源， 不定根则起源于愈伤组织较深处，是内起源。 (2)用花器官进行初代培养选取未开放花营的花丝、花柱和子 房作为外植体较好，花器官的这三个部分对诱导形成芽的能力反应顺 序为花丝花柱子房；花器官在初代培养中的最适培养基为MS+BAl．0 mg／L+NAAO．5mg／L。显微观察发现花器官离体培养后其形态学下端 切口内方的1～3层细胞首先脱分化，然后是其内方的10～12层细胞， 也属于多细胞起源。培养自始至终花丝和花柱形态学上端的细胞均保 持未启动的特征。花器官的器官分化方式跟鳞片的一致。 (3)无菌苗叶片对诱导形成芽的能力反应顺序为基部中部顶 部；最适培养基为MS+BA2．0 mg／L+NAAO．2mg／L。显微观察发现无菌 苗叶段培养后其远轴面切口附近的表皮细胞和表皮以内的几层叶肉细 胞首先脱分化，然后启动位置由切口处沿着表皮向内延伸，使得叶段 远轴面表皮之内的第1～2层叶肉细胞全部启动，也属于多细胞起源。 器官分化方式是在愈伤组织的较表层形成不定芽。 (4)组织培养中产生三种类型的愈伤组织：第一种愈伤组织结 构致密，生长较慢，容易分化成苗；第二种愈伤组织结构疏松，生长 旺盛，增殖快；第三种结构疏松，生长慢，容易褐化死亡。第一种和 第二种愈伤组织可相互转化。胚性愈伤组织是一般形成于第一种与第 二种愈伤组织内部，增殖与分化能力均很理想。显微观察发现第二种 愈伤组织细胞排列紧密、细胞核大、染色较深，第一种和第三种愈伤 组织细胞排列疏松、细胞核小、染色较浅。 关键词：mirella百合鳞片花器官无菌苗叶片组织培养 细胞组织学 ASlANLlLlUMTISSUECULTURE ANDSTUDY0NI TSMORPHOGENESI SWAYS ABSTRACT ^ andsterilerizedleafofAsianlilium— Usingscale，floral organs mirellaas