小麦成熟胚脱分过程中cdpks及其相关基因的差异表达分析.pdfVIP

摘要 CDPKs是目前所知ca2+信号的转导途径中重要成员之一，参与调节了植物生长发育的 许多重要过程。为了研究CDPKs在小麦成熟胚脱分化过程中的作用，本研究以离体小麦(豫 基因芯片技术检测各时点基因的表达信号，分析其中cdpks及其相关基因的差异表达，并选择 其中关键基冈进行real time．PCR验证，以期阐明cdpks在此过程中的可能作用。 研究结果表明：在含有61127个探针组，代表了55085个基因的小麦基冈组表达芯片上， 发生有意义表达变化的基因共约有15000个，有15个CDPKs基冈在小麦成熟胚脱分化过 程中发生了意义变化，其中上调表达基因12个，上调2～7．5倍，下调表达基因2个，下调 36．1倍，在不同时点有上调又有下调的1个，表明这些基因产物可能参与调控了脱分化的 进程。根据已知CDPKs生物功能和它们表达变化趋势以及这些变化趋势与脱分化过程中的 熟胚脱分化过程的启动和愈伤组织的形成。 为进一步研究cdpks及其相关基因的表达与小麦成熟胚脱分化进程的关系，我们从芯片 检测结果中共检测到CDPK靶基因及上游基因45个，分析表明这些基因在各时点表达的趋 过程中各时点的表达趋势，本文初步确定了Ca2+转导途径中几个重要成员作用的先后次序： Time PCR检测， 通过对BQ280973及其下游靶基冈质膜H+-ATPase基因hal进行Real 我们发现：一方面这2个基冈在成熟胚脱分化过程中有着活跃的表达变化，说明它们参与了 Time 小麦成熟胚的脱分化进程；另一方面Real PCR检测结果表明在脱分化的前期(6h)它 们的基冈拷贝数达到最人值，暗示BQ280973和PMH+-ATPase参与生长素(2，4．D)诱导的 脱分化过程的启动。同时这与芯片检测结果比较一致，表明该基因芯片结果可靠。 本研究利用高通量的小麦基因芯片，在基冈转录水平分析了cdpks以及其上下游相关基 因在小麦成熟胚脱分化过程中的表达变化，首次将CDPKs与小麦成熟胚脱分化过程联系起 来，为进一步揭示小麦成熟胚脱分化的分子机理开辟了新的研究思路。 关键词：成熟胚；脱分化；CDPK；基因芯片；差异表达 Abstract inthe ofDiffocnt of andItsReleventGenes Analysis Expressioncdpks DedifferentiationofMature晒eat Embryo Abstract in CDPKs been members of Asitisknownthat have recentlyrecognized勰thekey pathway essentialin and transductionand roles plantgrowth C矿signals play manyproeess鼯of inthededifferentiationofmaturewheat functionsofCDPKs embryo， development．