水稻pcd相关因的定位和棉花抗黄萎病rapd分析研究.pdfVIP

致 谢 本论文是在马峙英教授、罗耀武教授、刘国振副教授和中国科学院遗传研 究所朱立煌研究员的悉心指导下完成的。整个论文从试验设计、实施、修改到 完成，自始至终都凝聚着四位老师的心血。四位老师渊博的知识、严谨的治学 态度及忘我的工作热情，都给我留下了深刻的印象。恩师兢兢业业为科研、为 教学工作的献身精神，将永远激励着我在科研道路上奋进。值此论文完成之际， 真诚地感谢各位老师对我的谆谆教导及深切关怀。 本论文的研究工作主要在中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室 801组完成。感谢刘国庆老师在试验的实施及论文的写作中给予的指导和帮 助。感谢80 L组的翟文学副研究员、李小兵副教授、徐吉臣副教授在论文完成 过程中的指导与帮助。另外，同实验室的邵映田、方进、谢兵、Xg,l,建、江光 怀、陈学伟、郑先武等同学也给予了热情的帮助，在此一并表示衷一t3的感谢。 同时，河北农业大学的李莉云副教授、张桂寅副教授、刘占国副教授、王 省芬老师、吴立强老师、同学牛玉红、闰红波、王旭静、蓝岚、于艳军等在试 验中也给予了无私的帮助，在此向他们表示我真诚的谢意。 最后，向三年来一直关心我、帮助我的师长、家人、同学表示最诚挚的谢 意! 摘 要 ’近十几年来，分子标记技术发展迅猛，并且已成为基因遗传操作和植物育 种的重要工具。目前，除以分子杂交技术为基础的RFLP标记外，还有一类以 聚合酶链式反应(PCR)为基础的分子标记，如RAPD标记、SSR标记等。这类 分子标记具有快速、简单等优点，因而广泛应用于筛选连锁标记、定位重要基 因、构建遗传图谱以及标记辅助选择育种中。本文综述了目前常用的几类分子 标记的基本原理、多态性来源、引物类型、优缺点以及它们在植物基因定位、 标记辅助选择中的应用。? 本文采用SSR标记技术，对水稻细胞死亡控制突变体材料3037(突变体) 与另一水稻品种02428进行SSR扩增，筛选多态性标记。f结果表明，在159个 水稻SSR引物中筛选到61个在3037(突变体)与02428间具有多态性的引物， 而且这61个多态性引物在水稻12条染色体上分布均匀，基本覆盖了整套染色 体，说明它们可以作为一套多态性引物资料，用于3037(突变体)与02428 杂交后代F，分离群体中，筛选与突变体基因连锁的标记。另外，在159个SSR 引物中，筛选到6个在3037(突变体)与其野生型之间表现多态性的引物， 经F，分离群体单株检验后，有4个SSR多态性引物仍表现很好的多态性，由 于这4个多态性引物分别位于水稻的染色体8和12上，因此，将突变体基因 初步定位于水稻染色体8和染色体12上。最后，采用RAPD标记技术，在3037 (突变体)与其野生型之间筛选到8个多态性RAPD引物，为该基因的精细定 位、克隆、测序打下了很好的基础√”’ 本文采用RAPD标记技术，对棉花抗、感黄萎病基因池进行分析，建立了 一套适合于棉花随机引物扩增的RAPD反应体系及程序，为以后继续筛选RAPD 连锁标记打下了良好的基础。 关键词：RAPD：SSR；RFLP；AFLP；分子标记 多态性；基因定位；标记辅助选择 常用缩写词一览表 at260nm A260 absorbance 260nm处吸光度 DD r 碱基对 basepai cM 厘摩(尔根) centimorgans bromide CTAB 十六烷基三乙基溴化铵 cetyltrimethylammonium DNA acid deoXyribonucleic脱氧核糖核酸 dNTP 脱氧核苷三磷酸 deoxynucleosidetriphosphate EB bromide ethidium 溴化乙锭