氧化胁迫下alalibacterium sp.f26的生理应答机制.pdfVIP

摘要 摘 要 活性氧是微生物细胞在正常代谢过程中产生的一类化学性质极其活泼的基团或分 出细胞抗氧化物防御系统的清除能力时，活性氧就会攻击细胞成分引发一系列毒性效 应，造成对细胞的“氧化胁迫”作用。微生物为了生存必然对这种胁迫做出应答或应激 响应，通过自身的抗氧化防御系统降低活性氧的危害，从而表现为不同的生物学效应。 sp． F26为研究菌株，研究H202胁迫下Alkalibacterium sp．F26的生理应答机制。论文主要的 研究内容与结果如下： 明，不同时期添加H202对细胞生长和CAT合成的影响有较大的差异，初始添加不利于 CAT的合成，但对菌体生长抑制作用不明显；对数生长后期(18坳添加虽然对细胞生长 影响较大，但细胞对H202的响应程度较高，表现为CAT合成水平较高，当添加浓度为3 mM时，CAT酶活达到94．56 mM时，CAT酶活 u／mgprotein。但是，当H202的浓度达到4 急剧下降，说明体内合成的CAT的量远远达不到分解外来的H202的需求，此浓度已严重 伤害了细胞的正常代谢。 (2)采用高效液相色谱技术测定胞内代谢物浓度，研究氧化胁迫对4lkalibacterium sp．F26 辅因子的影响。研究结果表明：相比低浓度H202(1retool／L)胁迫，此菌株在高浓度 mmol／L H202(1retool／L)胁迫下的应答表现更为明显，即经3H202胁迫后胞内CAT酶 活为106．54 J-tmol／L下降 u／mgprotein，是对照产量的1．76倍：ATP浓度则从对照浓度20．55 到17．80 I．tmol／L；NAD+浓度自对照样品的69．89I』mol／L减少至31．77I_tmol／L。由于ATP和 后并不明显：除发现100I-tmol／LH202能够导致细胞防御机制的激活而使胞内ATP浓度相 比对照有所增加的情况外，经50 H202胁迫后胞内ATP水平从对照的 btmol／L和500}tmol／L 22．69 I_tmol／L只下降至1J22．38I_tmol／L和13．70I．tmol／L；并且此种胁迫条件下NADH浓度变 化也不显著。 着胁迫程度的增强，磷酸戊糖途径(pentose phosphate 酸脱氢酶(glucose-6-phosphate (glycolysis kinase， PK)来说，由于高浓度的氧化胁迫导致酶中巯基发生氧化修饰，两种酶的活性随胁迫程 度的增大而降低。此外，细胞在受到微量H202胁迫后，为了保证细胞的正常代谢，三羧 acid 酸循环(Tricarboxylic 程度逐渐增强，生物体内的CAT来不及分解外来H202的时候，SDH会因活性位点铁硫中 心的氧化而失活。 摘要 关键词：氧化胁迫，过氧化氢酶，辅因子，糖代谢关键酶 Ⅱ Abstract Abstract Reactive