水稻卷叶和小粒变体的筛选与分析.pdfVIP

摘要 sativa 水稻(OryzaL)是世界上最重要的粮食作物之一，同时也是单子叶植 物和禾本科作物分子生物学研究的模式作物。随着水稻基因组测序计划的全面完 成，阐明基因的生物学功能成为后基因组时代的重要研究内容，目前克隆的功能 基因仅有几十个，大规模T-DNA标签库创建将成为高通量研究水稻基因功能的主 要工具。本研究的内容主要包括卷叶突变体和小粒突变体的筛选，初步建立起适 基因组中的T-DNA侧翼序列，并对部分侧翼序列进行了分析。其主要研究结果如 下： 1 签系转基因植株进行田II自J调查和筛选，共得到卷叶突变体312份，小粒突变体 203份。 2 对水稻卷叶突变体分别从卷叶类型、卷曲程度、遗传分析等方面进行了研究， 结果表明，卷叶主要表现为诈卷类型，中度卷曲，并且多出隐性基因控制。小 粒突变体符合发育饱满、体积小、团的小粒表型标准，且明显低于标准日本晴 的千粒重。通过对小粒突变体的增强子捕获标签系和基因激活标签系表型变异 的分析发现，二者突变率分别为0．519％5}D0．671％，说明小粒突变体的突变频 率较低。 3 同一反应管中进行酶切连接的处理方法，节省了反应时间并提高了扩增的阳性 扩增分离，从而建立一套高效的侧翼序列扩增技术体系。 4利用改进后的PCR．Walking技术扩增经表型筛选出的卷叶、小粒突变体的 T-DNA插入位点侧翼序列，其中卷叶突变体获得54l条，小粒突变体获得38l 条。经过序列测定，对T-DNA和ToM7的插入位置进行初步分析，表明Tosl7 倾向插入基因内，而T-DNA在基因内与基因间中的插入没有偏好性。对卷叶 突变体T．DNA和Tosl7插入基因内部所获得序列的功能进行分析，发现只有 少数序列具有已知功能。通过共分离实验，初步确认2个小粒突变体的候选基 因。 7 关键词：水稻：突变体；卷叶：小粒：T-DNA：Tosl andSmallGrain and ofRolled—leaf Analysis Screening inRice Mutants Graduate： NingYingda and Genetics Major： Crop Breeding Caiying Supervisor：Prof．Zhang Prof．Ma Zhiying Prof．Lu Tiegang Abstraet Asoneofthemost inthe sativa staplecrops world，Rice(OryzaL)was important modelformolecularstudiesof and a