水分胁迫下柑橘od，cat及抗旱相关基因的研究.pdfVIP

摘 要 干旱是一种自然灾害，在雨量丰富的地区也会因分布不均或气候异常而导致 旱灾。柑橘是世界上具有较大经济价值的果树之一，主要分布在热带和亚热带的 135个国家。我国柑橘大多栽培于丘陵山地，常受到不同程度水分胁迫的影响， 严重制约了柑橘业产量的提高和品质的改善，因此，研究柑橘的抗旱机理有重要 的理论价值和实践意义。 本试验研究了水分胁迫下安化红【Cunshiu]、纽荷尔脐橙【c．sinensis(L) unshiu reticulata CAT的变化情况；研究了尾张[c Marc．]、安化红、太田[c SinensisJ、冰糖橙瞄Sinensis Blanco]、糖橙【c Osbeck]、纽荷尔脐橙、沙田柚、 积壳和枳橙【C．citrangeS．】与抗旱相关的基因，包括调控ABA合成相关的9一顺式一 环氧类胡萝h双加氧酶基因、玉米黄质环氧酶基因，调控JA合成相关的丙二烯合 酶基因和保护酶超氧化物岐化酶基因。研究结果如下； 1．水分胁迫下安化红、纽荷尔、沙田柚和枳壳的SoD活性从整个变化过程 来看是先升后降的趋势，大致可以分为三个阶段，土壤失水率在0％-40％为第 一个阶段，此阶段SOD活性交化平稳中略微上升，土壤失水率在40％-70％为第 二个阶段，此阶段SOD活性呈上升变化，土壤失水率在70％-90％为第三阶段， 此阶段SOD活性呈下降趋势，土壤失率在70％时是SoD活性的顶峰，继续失水 时SOD活性的显著下降。从不同的品种来看，枳壳的S01)活性变化最大，活性也 最高，安化红次之，再次为沙田柚，纽荷尔的SOD活性最弱。总CAT活性变化趋 势是先升后降，在土壤失水0％-40％阶段为上升过程，土壤失水40％-60％为下降过 程，土壤失水60％-80％为CAT活性变化的平稳期，土壤失水80％后CAT的活性又 开始下降，40％失水率是CAT活性变化的分水岭，失水超过40％后其活性开始下 降，70％后略有上升随后又开始下降。从个体来看，枳壳的CAT活动比其他几个 品种都高，沙田柚和安化红的变化趋势几近相同，纽荷尔的CAT活性相对来说要 稍弱。 2．用PCR方法找到9个柑橘品种的9一顺式一环氧类胡萝卜双加氧酶(NCED) 基因和丙二烯合酶(AOS)基因。对9一顺式一环氧类胡萝卜双加氧酶基因和丙二烯 合酶基因的PCR产物克隆和测序后在基因库中同源性比较发现，9个柑橘品种的 9一顺式一环氧类胡萝卜双加氧酶基因克隆片段与基因库中温州蜜柑(AB219174．1) 同源性在9896以上，丙二烯合酶基因克隆片断与基因库中温州蜜柑同源性为97％ 以上。 3．利用PCR技术没有找到，柑橘玉米黄质环氧酶(ZEP)基因和超氧化物歧 化酶(SOD)基因。 4．干旱处理样品后通过RT—PCR证明9个柑橘品种叶片中的9一顺式一环氧类 胡萝卜素双加氧酶基因和丙二烯合酶基因均表达。 关键词：柑橘；水分胁迫；超氧化物歧化酶；过氧化氢酶；基因 Ⅱ Abstract Citrusis fruit its andeconomic oneofthemost for richnutrient importantcrops values．Citrusis distributedover135 and countries，Water- mainly tropical subtropical isoneofllatlLral area stress the whercrainfallis also disastels,