水稻转基因受体统的建立及农杆菌介导法转基因的初步探讨.pdfVIP

。 摘要 sativa 水稻(OryzaL)楚世界上最重要的粮食作物之一。长期以来，稻米～直 是我国一半以上人口的主粮。随着生活水平的提高，入们对稻米营养品质的要求也越 来越高。其中，微量元素、蛋白质和必需氨基酸是人们主要关注的营养特性。赖氨酸 和甲硫氨酸楚入_稆动物必需的两种氨蘩酸，在人和动物体内不能自身合成，必须扶食 物中直接摄取。缺乏这两种氨基酸会造成人体代谢紊乱，甚至引发某些生理机能性疾 病。但是水稻作为入们豹主食，其赖氨酸和甲蕊氨酸含量却缀低。此外，水稻中微量 元素铁的含量也较低，人乳铁蛋白(human 豹糖基化蛋妇，可以可逆性地结合两个铁离子，hLF具有的生物学功能若麓为水稻瑗 利用，则将大大增加稻米内铁的生物有效性。水稻生产需要改善稻米的微撩元素、鬣 自质和必需氨基酸的翕量，才能适应人们的震求变化。利用传统蠢穗手段汀以改良水 稻的品质农艺性状，但缺点是育种周期长见效慢。实践证明，希Ⅱ用基因工程手段将控 制不同农艺性状的多个基因构建在同一载体的固一T-DNA上，导入垦标水稻中，可以 有效地改善稻米的品质。 在水稻基因工程中，为实现理想的转化效果，必须建立一个稳定、高效、易于丙 生的受体系统。本文以四个水稻品种为试验材料，研究了影响成熟胚和幼瓤培养效采 的一些主要因素，并且对成熟胚诱导培养基进行了改良，旨在建立一套稳定、高效的 遗传转化体系。并且应用农秆菌分导转化法将构建在弱一载体T-DNA上豹入巍铁蛋 磷究的结粜如下： 1。不同灭菌剂对外檀钵豹灭菌效聚不同。单一灭蓥剂灭萤效果不如灭蘩剂组台对 蘸剂组合对东稻种胚灭菌效粜最好。 2．蔗糖不是培养纂唯一碳源，培养基中用麦芽糖和蔗糖各一半混合使用或者单一 用蔗糖作为碳源效榘都比较好。若考虑到成本阏题，则使用蔗糖作为诱导培养基碳源 比较台适，但应注意其他糖类对组培的影响。 3．不同琼脂浓度对水稻愈伤组织的诱导效果不同。在诱导培养基中添加89／L的 琼脂粉对出愈率最离，诱导和培养效果最好。 mg／L的黼氨酸 4．鞴氨酸在组织培养中其有重要像用。在臻养基中添拥500—700 可以提高出愈率和培养力，但是这个浓度可能随着品种的不同而改变。 5．不同品种和不同外植体来源的水稻组织培养能力不同。出愈率主要取决于品 聃救基霭型，表现为粳稻培养效果普遍高于釉稻；在圃一品种中，成熟胚瓣出枣率普 趟筒子动胚，但是幼胚愈伤组织质量较好。 6．应用农杆菌介导法转化水稻，转化后经25．50mg／L潮霉素筛选两次，获得了 四株再生植株。 关键词：水稻； 农杆菌介导；愈伤组织；受体系统 II ，ABSTRACT sativa oneofthemost food inthe itis Rice(OryzaL．)is importantcrops world，and also foodofmorethan inChina．Withthe standard staple fiftypercentpopulation living andmole concem讲mthenutritionalvalueof beingimproved，molepeople rice， thecontentof and amino and especially micmelement,proteinrequired acid．Lyfne methionineare aminoacidsfor andanimal．Butcannotbe required people they