液态发酵美味牛菌生成壳聚糖的研究.pdfVIP

摘 要 壳聚糖(Chitosan，简称CS)又称聚氨基．D．葡萄糖，是几丁质的脱乙酰产物， 它是自然界中唯一存在的碱性多糖。由于其特殊的性质，壳聚糖被广泛应用在药物制 剂学、印染、化工、食品、农业等方面。目前，壳聚糖的工业化生产原料主要来自于 虾、蟹的外壳，该原料制备壳聚糖的提取方法耗能较高，对环境有污染，且原料受季 节和产地的影响较大。自从上世纪证实在真菌菌丝体细胞壁中有甲壳素存在以来，有 关从真菌菌丝中提取壳聚糖的报道不断涌现。但是大部分研究侧重于提取方法的研 究，对高产菌株的筛选与培养条件的优化的研究却不多。本实验主要通过利用对实验 室保藏的担子菌门牛肝菌科的美味牛肝菌液态发酵，研究得出高产壳聚糖的菌株培养 基主要组成成分和培养条件，并对发酵液中分离提取的目的物进行测定，主要研究结 果如下： 实验首先通过对美味牛肝菌液态发酵牛成壳聚糖的主要营养成分，碳源、氮源及 实验条件的单因子优化，确定了美味牛肝菌发酵的最佳基础培养基，结果表明美味牛 肝菌发酵生成壳聚糖的最佳碳源是葡萄糖，氮源是酵母浸出粉。并对其发酵条件进行 单因子优化，结果表明：在250mL三角瓶中美味牛肝菌的液态发酵生成壳聚糖的最 适pH5．5，温度28℃，装液量80mL，发酵天数6天。 在单因子研究基础上选择葡萄糖，酵母浸出粉和对实验结果影响较为明显的两个 发酵条件因素pH，装液量共四因子，使用DPS数据处理软件，设计响应曲面统计方 法(RSM)，优化出美味牛肝菌发酵生成壳聚糖的最佳条件。结果显示：以250mL三 角瓶作为发酵摇瓶，采用葡萄糖30．53∥L作为碳源，酵母浸出粉7．02∥L作为氮源， 聚糖最大积累量为3．8l∥L，占菌丝体干重的15．43％。实验的验证结果表明该方程有 较好的拟合性。 通过对产物进行红外光谱(瓜)和紫外光谱(UV)的定性分析，确认了从美味 牛肝菌中提取的物质为壳聚糖，并且达到了较高的脱乙酰度和纯度，具有较好的品质。 利用从美味牛肝菌中提取的壳聚糖进行抑菌活性实验，发现浓度为2％的壳聚糖 溶液对大肠肝菌及枯草杆菌都具有抑菌活性，且对大肠杆菌的效果要优于枯草杆菌， 从而为其的进一步实际应用奠定了基础。 关键词：美味牛肝菌，液态发酵，壳聚糖，响应曲面法，抑菌活性 Abstract iscalledaS isthe off Chitosan shuckingacetylproduction polyamino-D．glucose，and chitosan’S from istheexclusivealkaline inthenature．Becauseof chitin，which amylase isused in character,itwildlymedication，printing special crab ofindustrialized andSOon．At shellof and areusedasthesource present，theshrimp of chitosanuses substantive chitosan．Butthisextraction production wayproduction up the thesourcesisrestrictedseasonandlocation．Since environment，and