沙棘多糖的提取化、结构鉴定及其抗氧化性的研究.pdfVIP

摘要 摘要 HS-22、绥棘2号、绥棘3号、优胜、楚伊、卡图尼、浑金、丰产、巨人、乌兰格木、橙色、 金色共十七个品种为试材，对沙棘多糖的提取方法，纯化工艺，精多糖的分级、分子量、结 构及抗氧化性进行了研究。 在沙棘多糖的提取过程中，以大果沙棘HS一12为试材，首先分别对木瓜蛋白酶提取法和 超声波提取法进行研究，确定这两种提取方法的最佳提取工艺；然后将这两种方法以不同方 式结合，并最终确定沙棘多糖的最佳提取条件。在单因素试验基础上，采用正交试验得到木 瓜蛋白酶的最佳提取工艺为：加酶量2％，pH值5．5，提取温度45C，提取时间20min，多 糖提取量44．28mg／g：超声波法提取多糖的最佳条件为：超声功率480W，超声时间55rain， 固液比1：20，提取量48．63mg／g。在此基础上将这两种方法以不同方式进行结合：超声波法 与酶法同时进行提取，提取量为53．30 mg／g：先进行超声波提取而后进行酶法提取，提取量 为54．68mg／g。将这两种提取方法进行比较：超声波法与酶法同时进行提取方法的多糖提取 量最高，但从节省时间等因素综合考虑最终选择超声波法与酶法同时进行提取的方法为最佳 提取方案。 在脱蛋白工艺研究中，比较了Sevag法(10次)、木瓜蛋白酶法与木瓜蛋白酶+Sevag 法(3次)三种脱蛋白方法的效果。蛋白质去除率分别为51．10％、50．18％、88．17％；多糖提 取量分别为2．51 mg／g、54．30mg／g和48．56mg／g。从蛋白去除率和多糖提取量两方面综合考 虑，确定木瓜蛋白酶与Sevag法结合作用为除蛋白最佳工艺。 采用最佳提取条件，测定了十七个沙棘品种的多糖含量，发现不同品种的大果沙棘多糖含量 相差巨大。HS．12的多糖含量最高为54．30mg／g，橙色的多糖含量仅为O．75mg／g，此研究对选育多 糖含量较高的沙棘品种具有参考价值。 将脱色透析后的沙棘粗多糖通过DEAE．纤维素柱进行分级，得到两个级分，其中一个级 分H CL-4B凝胶柱层 II含量很高为沙棘多糖的主要成分。将此沙棘多糖级分进行Sepharose 析，得单一对称峰；通过紫外分光光度法测定，得单一对称峰；采用冻融分析得～均一淡黄 色透明液体，由此证明HII为均一组分。 通过粘度法测得此精多糖分子量为10．94x104；通过红外光谱分析可知其糖苷键即有n 构型同时也具有B型；将其进行酸水解而后，进行纸色谱和薄层色谱分析测得其单糖组成含 有木糖、葡萄糖、半乳糖。 分别采用DPPH自由基法和连苯三酚自氧化法，进行了沙棘多糖清除DPPH、和超氧自 由基02·的抗氧化试验。结果表明，沙棘多糖对超氧自由基02-·有较强的清除能力，并明 显高于人工合成的抗氧化剂BHT，但对DPPH·清除能力较差。 关键词：沙棘；多糖；提取；纯化：抗氧化性 Studieson and AntioxidativeEfiectofthe in in PolysaccharidesPolysaccharides L． Rhamoides Hippohpaes Abstract Eventeen rhamoidesL Hippohpae researchinstituteof usedasmaterials nse，culturedber