玉米淀粉合成酶基因（zss1）启动子载体构建及胚乳瞬时表达.pdfVIP

中文摘要 玉米胚乳中起主要作用的是淀粉合成酶是zSSI，其编码基因是zsSl，该基 因是玉米淀粉合成过程中的关键酶基因之一。本研究通过对本课题小组克隆的 zsSl启动子(1637 的CaMV35S组成型启动子，以gus为报告基因，构建了5个新的植物表达载体。 经基因枪轰击后，在授粉后15天的玉米自交系18—599胚乳上进行瞬时表达。然 后，用荧光定量检测GUS表达量，测定启动子的活性，对zsSi启动子的不同缺 失片段进行研究，以初步了解zsSl基因的调控机理。研究结果如下： 8k。 p10．25k，p10．1 2)利用玉米胚乳瞬时表达检测zsSl启动子缺失体的功能，结果表明，在 元件，正调控启动子活性。 3)GUS瞬时表达的结果表明，构建的zsSl启动子各缺失体表达载体都具 有启动子活性，同时根据构建的p10．25k缺失体调控下的GUS基因表达活性最强， 初步确定zsSi启动子在玉米胚乳中的最短有效片段为一185至U+51。 4)经DNA序列分析，本研究中的玉米淀粉合成酶zsSl启动子序列，缺乏 典型真核启动子的核心元件，TATA—box，属于不典型启动子。但该启动子含有 启动子具有特殊的组织形式，可能与其特殊的基因表达调控机制有关。对最强表 G—box， 达载体p10．25k的序列分析表明，p10．25k启动子具有CAAT-box， AACA．motif,这些重要的顺式作用元件。 关键词： 淀粉合成酶I； 启动子； 瞬时表达； 顺式作用元件； 玉米 Abstract This is on starch a maize is seed study zsSl，which specific synthase does effectonmaize isa in promoter,andimportant endosperm．zsSlenzyme key maizestarch isonthe of the synthesis．It purposeunderstandinggenieregulatory mechanismofzsSlandits in thatthis specificexpressionendospermexperiment thecloned 163 1301 vector analyses sequence7bp，constructspCAMBIAexpressing 、)l，itll 5’deletion aretransient 8k，which segment：p11．6k，p10．8k，p10．5k，p10．25k，p10．1 in15DAP after bombardment．Then expressed endospermparticle usingquantitative fluorometricGUS