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38 发 酵 工 程 主要内容： 发酵工程含义、类型、特点 发酵过程 液体深层发酵 一、发酵工程概况 （一）发酵工程发展 微生物学的奠基人——伟大的巴斯德 我国的传统发酵产品酱油、醋、腐乳等享誉世界 我国的酿酒已经有4000多年的历史 我国的酱油距今已有3000年的历史 1857年巴斯德证明发酵是由于微生物的作用 （二）发酵工程概念 采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程中的一种新技术。也称微生物工程。 （三）发酵工程的内容 现代发酵工程不仅包括菌体生产和代谢产物的发酵生产，还包括微生物机能的利用。 主要内容有： 生产菌种选育 发酵条件的优化与控制 反应器的设计 产物的分离、提取与精制 （四）发酵类型 1）根据微生物种类不同分为：好氧性发酵和厌氧性发酵 2）根据培养基状态不同分为：固体发酵和液体发酵 3）根据发酵设备分： 敞口发酵、密闭发酵、浅盘发酵、深层发酵 4）根据微生物发酵操作方式的不同分为 分批发酵、连续发酵、补料分批发酵 （四）发酵类型 5）根据微生物发酵产物的不同分为 微生物菌体发酵：以获得某种用途的菌体为目的的发酵 微生物酶发酵：以获得微生物酶制剂 微生物代谢产物发酵：获得微生物代谢产物 微生物的转化发酵：利用微生物细胞的一种或多种酶把一种化合物转变成结构相关的更有经济价值的产物。 生物工程细胞发酵：指应用生物技术获得的细胞进行培养的新型发酵（动、植物细胞，杂交瘤细胞等的培养）。 （五）发酵技术的特点 1、发酵过程以生命体的自动调节方式进行，数十个反应能在发酵设备中一次完成 2、反应通常在常温在进行，条件温和，能耗少，设备简单 3、原料可以是农副产品、工业废水或可再生资源 4、容易产生复杂高分子化合物 5、发酵过程中要防止杂菌污染 二、发酵过程和调控 发酵过程一般包括了以下的基本步骤： 菌种的选育 培养基的配制 灭菌 扩大培养和接种 发酵过程 分离提纯 （一）菌种的选育 1、发酵工业中常用的微生物 细菌：枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌等 放线菌： 酵母菌：啤酒酵母、假丝酵母等 霉菌：根霉、曲霉、青霉等 其他：如藻类、病毒 （一）菌种的选育 2、选育的方法： 从自然界中先分离出相应的菌种； 利用诱变筛选出符合生产要求的优良菌种； 利用基因工程、细胞工程的方法构建工程细胞或工程菌。 举例： 可将人工合成的人的胰岛素基因与大肠杆菌的质粒结合，形成重组DNA，再把重组DNA导入大肠杆菌细胞内形成工程菌。通过筛选则可培养出能生产人的胰岛素的菌种。 （二）培养基的配制 1、培养基的种类 孢子培养基：制备孢子用的。 种子培养基：供孢子发芽和菌体生长繁殖用的。 发酵培养基：供菌体生长繁殖和合成大量代谢产物用的。 （二）培养基的配制 2、培养基配制的原则： a、根据不同的菌种，选择不同材料配制培养基 配制的培养基应满足微生物在碳源、氮源、生长因子、水、无机盐等方面的营养要求，并为微生物提供适宜的pH。 b、培养基的营养要协调，以利于产物的合成。 c、培养基在满足微生物的营养需求的基础上应尽量降低生产成本，以得到更高的经济效益。 举例： 发酵生产常采用天然成分的液体培养基。而且，经常用野生的植物淀粉、甘蔗渣、秸秆，以及乙醇、醋酸等石化产品代替粮食来配制培养基。 （三）灭菌 包括设备灭菌和培养基灭菌 1、灭菌的原因： 在发酵过程中如混入其他微生物，将与菌种形成竞争关系，对发酵过程造成不良影响 。 2、灭菌的方法： 湿热灭菌。灭菌温度和时间以能否杀死热阻大的嗜热菌芽孢为指标 举例： 如果在谷氨酸发酵过程中混入放线菌，则放线菌分泌的抗生素就会使大量的谷氨酸棒状杆菌死亡。 如果在青霉素生产过程中污染了杂菌，这些杂菌则会分泌青霉素酶，将合成的青霉素分解掉。 （四）种子扩大培养和接种 1、扩大培养含义： 扩大培养是将保存在沙土管、冷冻干燥管或冰箱中处于休眠状态的商场菌种接入试管斜面培养基上活化，再经过茄子瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养，以促使菌体数量快速增加，能在短时间里得到大量的纯种。 种子的制备一般使用种子罐，扩大培养的级数通常为二级。 2、接种： ?接种过程中要注意防止杂菌污染 （五）发酵 微生物的发酵是将已经扩大培养、旺盛繁殖的种子在一定条件控制下继续生长繁殖并积累代谢产物。 发酵阶段以获得大量产品 为目的，是整个发酵工程的中心环节。 1、发酵的方式 固体发酵和液体发酵（工业上最常用） （1）液体深层发酵 1）分批(间歇