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光照对n介导的病性的影响及其分子机理

致 谢 本论文是在姆师蔡新忠副教授的精心指导下完成的。从论文选题、构思、实 验方寒敬铡定帮实麓至g磅究蘩鬃豹分撰整理、论文豹修改到最惹豹定秘,无不是 蔡鬻师心斑与智慧的结晶。他豁达的处世原则、博大的胸怀、渊博的举谈、严谨 的治学态度、敏锐的学术洞察力以及授业的严格和耐心在我心中打上了深深的烙 印。嚣年来,导耀对我学习、王作、生活等多方覆绘予诸多关心与教搏。赝有这 些派在改变我静徐值观念,并将会深亥4影响我今后的人生走向。我会始终铭记臻 老师的悉心教诲,不辜负导师的培养和殷切希望。值此论文完成之际,辩次感谢 感谢蔡老褥豹关心,著献上我锻诚挚豹祝掇酾谢意! 巩中军、杨璩、杨璞、王光华、李大勇簿博士生,张波涛、葛林梅、印币Ⅱ梅、 礼荫等硕士生,绘予许多支持、建议和毫无保留的帮助。在此表示衷心的感谢! 蘩瀣骂孛肇教授,凝瑷荣教我,李盔时教毅在实验中给予诲多套蔻慈议稿热撬 帮助。 十分感谢与我~起并肩战斗的博士生洪猿,搏士生徐秋芳,硕士生张红志、 雳鑫等霹我懿关,§、鼓藏与帮魏,特烈感澎磺士生王瘫霸王长誊藩±纛实验中豹 大力帮助! 怖佛年 20酾零S是予肇褰涎 浙江大学硕士论文 摘 要 光照条件严重影响植物病害的发生,但光照对植物基因对基因抗病性和非寄 主抗病性的影响及其机理知之甚少。本研究分析了光照对烟草对炭疽菌的非寄主 抗性,以及^吻如介导的基因对基因抗病性的影响及其分子机理,取得以下结果: 1.以除草剂敌草隆为光合作用电子传递系统中光系统II的抑制物,研究了 光合作用途径对^冶鲫介导的基因对基因抗病性和烟草对炭疽菌薏苡分离物的 非寄主抗病性的影响。 结果显示,23.3 mg.L.1敌草隆处理加速^伽卯烟草苗中 过敏性反应(hypersensitive response,HR)的产生。原本为烟草非病原的炭疽菌 薏苡分离物成功侵染经23.3 mg.L.】敌草隆处理的原本为非寄主植物的烟草,形 成细小炭疽病病斑。但病斑扩大受到明显限制,不产生大量分生孢子。因此,光 系统II介导的途径减弱Ⅳ介导的抗性,但增强烟草对炭疽菌薏苡分离物的非寄主 抗性。 这些结果表明,光系统II介导的途径影响多种形式的抗病性,并且对不 同形式的抗病性的影响作用不同。 2.分析了光照对^净鲫介导的HR的影响及其分子机理。发现,光/暗周期 和光照时间显著影响.M2,如烟草苗HR症状的表现。脚50烟草苗表现HR症状 所需时间与光朋音周期中光照时间长度呈密切反相关。将^坳如烟草苗从280c移 至220c下培养,在持续黑暗条件下培养21h,^物5D烟草苗即开始表现HR症 草苗开始产生HR的时间分别为23h,26h和32h;产生全株萎蔫时间分别为32h, 40h和52h。而在持续光照条件下,培养48h后才开始产生HR,至72h后才出 现全株萎蔫。这些结果说明短光照周期和黑暗条件加速并增强了脚j0介导产生 的HR。 研究了温度与光照影响肋筇D烟草茁过敏性坏死的相互关系。发现,在高温 条件下,光照对^伽50烟草苗过敏性坏死的影响减弱。将脚如烟草苗置于高温 续光照条件下培养的肋jD烟草苗均不产生HR,只有在持续黑暗条件下才能产 生HR,而且与在低温(22℃)条件下相比,产生HR的时间大大延长,培养7d 后才产生。说明温度对晰5D介导的HR的作用强于光照。 浙江大学硕士论文 采用Nonhem印迹方法分析了光照对面0,HR标志基因H娘2D土,,以及防 卫反应相关基因P足6表达的影响。结果表明,黑暗显著增强这些基因的表达, 而光照则强烈抑制芦5D基因的表达。 采用RealTime—PCR技术分析了光照对Ⅳ基因表达的影响。结果显示,在Ⅳ 纯合植株中,黑暗与光照处理下Ⅳ基因的表达量只有在处理后12h差异较明显, 黑暗处理时表达量为光照处理时的1.67倍,其它时间点两者表达无显著差异。 然而在^冶加植株中,黑暗与光照处理下Ⅳ基因转录本积累量有显著差异。

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