最新第八章土壤微生物.pptVIP

1）微生物在污染环境和环境保护中的作用 2）微生物生态研究方法的探讨 3）生态环境、种群分布规律 内容涉及 条件致病菌 致病条件 正常菌群与宿主间的生态平衡被打破，原来不致病的正常菌群就成了条件致病菌 1.寄居部位的改变 2.免疫功能低下 3.菌群失调 4．制定适合我国国情的土壤微生物卫生标准 要加强对土壤病原微生物种类、数量、存活时间、迁移转归的研究、调查与监测 通过流行病学调查、临床检查、实验室研究，揭示人群暴露方式和剂量、生物学效应和健康水平状况 通过资料的收集整理，风险评估，进而制定符合我国国情的土壤微生物学卫生标准。 谢 谢！ 土壤微生物的卫生学意义 参与生物地球化学物质循环和能量流 产生复杂多样的中间和终末代谢产物 土壤修复和净化 经食物、水、空气等迁移 微生物学环境质量评价 外来病原微生物的污染、条件致病微生物 第三节 土壤微生物的检测与卫生标准 一、土壤卫生微生物检测 二、土壤微生物的卫生标准 一、土壤卫生微生物检测 土壤卫生微生物检测目的在于测定土壤污染的性质和污染程度，为改善环境卫生，规划城区建设提供卫生学依据。 土壤污染特点： 1.污染物移动较慢 2.混合不均匀 3.主要集中于排放地带 样品采集 选择有代表性的采样地点，可从整个地域内随机多点取样。 土壤采样布点法 (a)对角线布点法 (b)梅花形布点法法 (c)棋盘式布点 (d)蛇形布点法 所有样混合均匀 样品分成4等份 弃去 弃去 留用2部份样 四分法取样步骤 样品的稀释 将土样置灭菌乳钵内研磨均匀，无菌称取10g，加入盛有90ml无菌自来水的广口瓶中，充分振摇混匀，静置5～10min，取出上清液作为原液，该原液1ml含相当于土样0.1g。取原液1ml，加入盛有9ml灭菌水中，混匀成10-1稀释液，然后进一步作10倍系列稀释。根据污染情况，采用几个稀释度进行检验。 操作步骤 称取10g土样 振荡10min 90ml 9ml 9ml 9ml 9ml 9ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 20ml 20ml 20ml 倒培养基 2× 检验项目与检验方法 1.菌落总数(heterotrophic plate counts)的测定 2.大肠菌群(coliform group bacteria)的检验 3.产气荚膜梭菌的检验 4.土壤中致病菌和病毒的检测 1.菌落总数 是指于固体培养基上，在一定条件下培养后单位重量 (g)、容积 (ml)、表面积 (m2)或体积(m3)的被检样品所生成的细菌菌落总数。它只反映一群在普通营养琼脂中生长的、嗜温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数，常作为被检样品受污染程度的标志，用作土壤、水、空气和食品等卫生学评价的依据。 菌落总数操作步骤： 制备土壤稀释液 接种平皿 37℃培养 计数菌落 2.大肠菌群 是指一群在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。这一群细菌包括大肠杆菌属、桔椽酸菌属、肠杆菌属、克雷伯菌属中的一部分，它们主要来自人和温血动物的粪便，故以此作为土壤、水和食品等受粪便污染的标志，以其含量多少来判定卫生质量。 伊红美蓝上 的大肠杆菌 大肠菌群多管乳糖发酵流程图 初发酵 复发酵 平板划线 镜检 大肠菌群值 (产气荚膜梭菌值)是指能检出一个大肠菌群细菌(产气荚膜梭菌)的最小土壤量 (g)。 大肠菌群值= 检测大肠菌群可用来评价土壤是否被人或温血动物的粪便污染，并提示有无被肠道病原体污染的可能。 大肠菌群数越大，表示被粪便污染越严重；大肠菌群值越大，表示土壤越干净。 产气荚膜梭菌为芽孢菌，对外界环境抵抗力强，生存时间较长。结合大肠菌群值，可辅助判断土壤被粪便污染的时间。若发现大量产气荚膜梭菌而大肠菌群菌很少时，表示土壤非新近被粪便污染；反之，则表示新近的污染。 二、土壤微生物的卫生标准 目前我国尚未颁布土壤微生物卫生标准，下表是国外标准，仅供参考。 土壤卫生状况评价指标 卫生状况 大肠菌群值（g） 产气荚膜梭菌值（g） 严重污染 ＜0.001 ＜0.0001 中度污染 0.01~0.001 0.001~0.0001 轻度污染 1.0~0.01 0.1~0.001 洁净 ＞1.0 ＞0.1 土壤卫生细菌学标准 卫生状况 大肠菌群值（g） 产气荚膜梭菌值（g） 硝化细菌值（g） 嗜热菌数（cfu