鸡卵巢发育相关irna与基因的鉴定及特征分析.pdfVIP

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2016-02-27 发布于贵州
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鸡卵巢发育相关irna与基因的鉴定及特征分析.pdf

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鸡卵巢发育相关irna与基因的鉴定及特征分析

英文缩略图表万方数据目录中文摘要……………………………………………………………………………………………………。I Abstract…………………………………………………………………………………………………………………．．III 1前言……………………………………………………………………………．…………………………………………1 1．1鸡的卵巢和卵泡发育……………………………………………………………………．1 1．1．1发育过程………………………………………………………………………………．．1 1．1．2发育机制………………………………………………．?………………………………1 1．1．3产蛋性状相关基因的研究进展………………………………………………………．．1 1．2高通量技术的应用………………………………………………………………………．2 1．3miRNA的研究进展………………………………………………………………………3 1．3．1 miRNA的发现…………………………………………………………………………．3 1．3．2 miRNA的作用机制……………………………………………………………………．3 1．3．3 miRNA在禽类的研究进展……………………………………………………………．4 1．4转录组测序技术的应用…………………………………………………………………．4 1．5本研究的目的意义………………………………………………………………………．5 2材料与方法……………………………………………………………………………………………．6 2．1试验材料…………………………………………………………………………………。6 2．1．1试验动物及样品采集…………………………………………………………………．．6 2．1．2主要试剂………………………………………………………………………………．．6 2．1．3主要仪器………………………………………………………………………………．．6 2．1．4主要的数据库及生物学分析软件……………………………………………………。7 2．2高通量测序及生物信息学分析…………………………………………………………．7 2．2．1样品总RNA的提取……………………………………………………………………7 2．2．2TotalRNA样品检测……………………………………………………………………8 2．2．3small RNA测序文库构建………………………………………………………………8 2．2．4small RNA测序数据分析………………………………………………………………9 2．2．5转录组测序文库构建…………………………………………………………………12 2．2．6转录组测序数据分析…………………………………………………………………13 万方数据 5 2．3．1总RNA提取…………………………………………………………………………………。15 2．3．2 miRNA Poly加尾和反转录……………………………………………………………15 2．3．3 2………………………………………………………………………………………………………。16 qRT．PCR 7 2．4．1 mRNA反转录…………………………………………………………………………17 2．4．2 8 qRT-PCR…………………………………………………………………………………………………………．1 2．6数据统计与分析…………………………………………………………………………20 3结果与分析……………………………………………………………………………………………21 3．1RNA质量检测…………………………………………………………………………．．21 3．2smallRN