实验六蛙心灌流要点.pptVIP

实 验 八 蛙心灌流 【复习理论内容】 1. 心脏的生理特性? 2. 心肌收缩的特点？ 3. 心脏的神经支配及作用？ 【实验步骤】 一、离体牛蛙心脏制备 1.取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓。 2.打开胸腔，暴露心脏。 4.将松结线扎紧，并固定在插管的侧管上。 注意事项 ① 固定换能器时，应稍向下倾斜，以免从心脏滴下的水流入换能器内 ② 随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润 作业 P83 N3、4 预习实验 实验10-7：视力、视野、盲点和色盲的测定 实验10-4：声音的传导途径 * * (perfusion of frog’s heart) 【实验原理】 心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。 蛙心脏离体后，用任氏液灌流，心脏在一定时间内可保持节律性收缩与舒张。改变灌流液的成分，心脏跳动的频率和幅度会随之发生改变。 用离体蛙心灌流的方法观察： ① Na+、K+、Ca2+ ② E、Ach 对心脏活动的影响 【实验目的】 【实验对象】 BL-420S生物机能实验系统 张力换能器、蛙心夹 蛙心插管、试管夹 缝合线、双凹夹 万能支台 蛙类手术器械 滴管两只 【实验器材和药品】 任氏液 0.65％NaCl l％KCl 3％CaC12 l：10,000 E l：10,000 ACh 3％乳酸 2.5％NaHCO3 （腹面） （背面） ? 在主A干下穿一线打 一松结；在左主A下再穿一线结扎。 ? 在A圆锥、左主A根部剪口，将蛙心插管插入心室内。 插管插入心室标志 见血液涌入插管内，并随心跳上下波动。 3. 蛙心插管 5.摘出心脏 任氏液冲洗数次 （避免损伤静脉窦） 二、连接实验装置 换能器 1.用试管夹将蛙心插管固 定在万能支台上 2.把张力换能器固定在万 能支台上，在心室舒张 期将与换能器相连的蛙 心夹夹在心尖上。 *换能器的连线应与插管中轴在同一直线上，即与地面垂直 换能器 启动 BL-420S生物机能实验系统 “循环实验” “实验项目” “蛙心灌流” 描记蛙心收缩曲线 三、观察项目 调整增益 、走纸速度，使蛙心收缩曲线至最好观察形态。 （一）描记正常心搏曲线 曲线幅度 —— 收缩的强弱 曲线疏密 —— 心率 曲线规律性 —— 心跳的节律性 曲线基线 —— 舒张的程度 顺序 观察项目 药量 心肌(率、力)变化任氏液 灌流 0.65%NaCl 灌流 3%CaCl2 1～2滴 1～2滴 1%KCl 1:10000 E 1:10000 Ach 3% 乳酸 2.5% NaHCO3 1 滴 1 滴 2～4 滴 1～2滴 （二）离子和药物的影响 *【注意事项】 ? 当每种化学药物作用已明显时，应立即 将蛙心插管内液体吸出而换上任氏液数 次，以免心肌受损。 ? 须待心跳恢复正常后，才能进行下一实 验项目。 ? 每次换液时，蛙心插管内液面应保持相 同高度。 ? 吸管使用要分开，不可混淆。 顺序 观察项目 药量 心肌(率、力)变化 1234567 任氏液 灌流 0.65%NaCl 灌流 3%CaCl2 2～4滴 2～4滴 1%KCl 1:10000 E 1:10000 Ach 5%NaCl 2～4滴 2-4 滴 正常 力↓ 力↑，舒张不完全 力↓ 心率↑ 力↑，心率↑ 力↓，心率↓ 2～4滴 【实验结果】 【实验结果】 【结果分析】 任氏液：正常对照 2. 0.65%NaCl灌流 0.65%NaCl灌流 → Ca2+内流↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓ [Ca2+]i↓ 【结果分析】 任氏液：正常对照 3. 3%CaCl2（1～2滴） Ca2+内流↑ 兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑ [Ca2+]i↑ [Ca2+ ]o↑ *舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离，产生Ca2+强直，基线上移。 【结果分析】 任氏液：正常对照 4. 1%KCl（1滴） AP平台期缩短 Ca2+内流↓ 兴奋-收缩耦联↓ 收缩力↓ 【结果分析】 任氏液：正常对照 5. 1:10000E（1～2滴） Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑ E-C耦联↑ 收缩力↑ 与心肌β1受体结合 cAMP 4期 If 、I CaT通道↑ 4期自动去极速度↑ 自律性↑ 心率↑ 【结果分析】 任氏液：正常对照 6. 1:10000Ach（1滴） 最大复极电位↑ 4期K+外流↑ 自律性↓ 心率 ↓ 与心肌M受体结合 K+外流↑, Ca2+内流↓ [Ca 2+ ]i↓ E-C耦联↓ 收缩力↓ 1. 心肌的生理功能依靠内环境稳态 2.