实验细胞形态与构造的观察要点.docVIP

1. 细胞通常非常微小，无法以肉眼观察，因此必须借助显微镜。 2. 大多数细胞内的构造是无色的，必须经由染色增加对比，以利观察。 3. 比较植物细胞与动物细胞的不同，如：形状、基本构造、胞器。 　(1) 植物细胞：具细胞壁、中央大液泡、叶绿体、粒线体、核套膜、内质网、高基氏体、细胞核。虽无中心粒，但有微管系统，因此进行细胞分裂时，可形成纺锤丝。 　(2) 动物细胞：不具细胞壁及叶绿体、中央大液泡。具粒线体、核套膜、内质网、高基氏体、细胞核及中心粒等。 4. 玻片染色技巧： 　(1) 标本不可染太浓，否则影响其透光度。 　(2) 动、植物细胞的染色，可用碘液及亚甲蓝液，呈现出的细胞核颜色较深，细胞质色较浅，如碘液则分别为深褐及浅褐，亚甲蓝液则分别深蓝及蓝。 5. 染色原理： 　(1) 碘液：与直链淀粉反应形成一种蓝色复合体，呈蓝色反应；和支链淀粉形成紫红色反应；肝糖结构与支链淀粉相似（多支链），和碘液反应呈红色。纤维素不溶于水，不与碘液反应。 　(2) 亚甲蓝液：为硷性染料，具有阳离子的助色基，因而可和带阴电的物质结合，呈现蓝色。细胞核内有许多带阴电的核酸，因此用亚基蓝液可使细胞核呈深蓝色。 6. 实验过程中必须注意的事项： 　(1) 取出的口腔黏膜细胞、叶片表皮细胞皆须迅速置于滴水载玻片上展开，否则干皱影响透光度及失真。 　(2) 避免细胞变形或不完整，载玻片上的水滴应是细胞或组织的等张溶液。 　(3) 每一种生物细胞或组织的等张溶液不同，如：人类为90％的生理食盐水、蛙为70％的生理食盐水、植物通常0.2 M蔗糖溶液，但植物细胞有细胞壁可固定其形状，故可直接滴水。但单独的胞器，如叶绿体的观看还是得置于适宜的蔗糖溶液中。 　(4) 如果将动物组织或细胞置于低张溶液中，细胞将会膨胀而破裂，如置于高张溶液中则萎缩。植物组织或细胞因为细胞壁的保护，置于低张溶液中因膨压故，细胞膜紧贴细胞壁，而无法见到，但不会破裂。然而置于高张溶液中则发生细胞膜内缩，即质离现象。 　(5) 盖玻片以45°角轻轻覆盖在标本上，避免空气进入产生气泡，如果有气泡产生应轻敲将气泡赶出，否则影响显微观察，以致于无法分辨真正细胞中的内容物。 　(6) 为了看清楚细胞，往往须加上染剂，即进行玻片标本的染色。 7. 器材使用注意事项： 　(1) 取样时须注意新鲜度，否则干皱或污染将影响观看真实性。 　(2) 如果要保留以后再观看，盖玻片四周用凡士林、指甲油或透明胶带封住。  A 制作水埋玻片标本方法 取干净载玻片 在载玻片中央　滴一小水滴 将标本放置载玻片的小　水滴中 取盖玻片以45°角轻轻　覆盖在标本上 完成玻片标本制作 B 玻片标本染色的两种方法 1. 制作标本时，直接将染剂滴于标本上，染剂量要少，可在上好染剂的玻片的反面以细水流沿着玻片一端往下流过，带走多余的染剂。 2. 制好标片后，即在盖玻片上的一端滴上染剂，再从另一端以吸水纸吸去多余染剂即可。　　  Q：细胞用亚甲蓝液，主要凸显哪一部分？为什么？ A：细胞核；细胞核内带有许多带阴电的核酸，因此用亚甲蓝液可形现深蓝色的复合物。 C 动物细胞的观察 1. 观察人类口腔黏膜细胞流程： 滴一小滴90％生理食盐水（林格氏液）至载玻片上 以牙签的钝端轻刮口腔两颊的黏膜 将刮起的黏膜细胞置于载玻片上的生理食盐水 以牙签轻轻搅和，使细胞散开悬浮于液体中 亚甲蓝液或碘液染色 将置于显微镜下观察 （先用低倍找再用高倍观察） 　 1. 以亚甲蓝液染色且在显微镜下呈现的口腔黏膜细胞，如下图：  2. 细胞呈扁平不规则样，细胞排列疏松。 3. 深蓝色点为细胞核，浅蓝色为细胞质。 4. 细胞核位于中间位置。 5. 如果以碘液染色，细胞核将呈现深褐色，细胞质则呈现浅褐色。 6. 0.9％林格氏液是人类细胞的等张溶液，水分子进出细胞膜内外，呈动态的平衡，因而维持正常的细胞形态与大小。 7. 如果以蛙的生理食盐水或清水替代林格氏液，因是低张溶液，所观察到的细胞将呈膨胀状或涨破，如果置于高张溶液中，则会脱水呈萎缩状。 2. 人类血液的观察： 　(1) 利用血液玻片标本 取人类血液抹片标本 置于显微镜下观察 区分红血球、白血球 、血小板（先用低倍找再用高倍观察） 　(2) 自制血液玻片标本 自制人类血液细胞流程： 将针及毛细管消毒 用针轻刺手指或耳垂 用毛细管吸取血液 置于载玻片上 取另一片玻片横立呈斜面将血滴抹成薄层 盖上盖玻片 置于显微镜下观察（先用低倍找再用高倍观察） 　 1. 血液中有红血球、白血球及血小板，如右图。 2. 其中只有白血球有核，且形状多样。 3. 红