镉暴露家兔睾丸和肝脏中小分子金属结合蛋白的分离与比较.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(3):1091-1099 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.03.043 镉暴露家兔睾丸和肝脏中小分子金属结合蛋白的分离与比较 1 1 1 1 1 1 1 1 2 3 卞建春 ，郭恒杰 ，王捍东 ，刘学忠 ，袁 燕 ，任建新 ，刘宗平 ，王宗元 ，康世良 ，武 瑞 1 2 3 （扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009 ； 东北农业大学动物医学院，哈尔滨 150030 ； 黑龙江八一农垦大学动物医学院，黑龙江大庆 163319 ） 摘要：【目的】通过对镉暴露家兔睾丸和肝脏中小分子金属结合蛋白分离与比较，揭示动物睾丸组织镉高敏 感性的机制。【方法】6 月龄雄性青紫兰家兔经皮下染镉，9 d 后将兔子杀死，制备睾丸和肝脏匀浆超离上清液， 用Sephadex G-75凝胶层析法进行蛋白分离，经双波长（280 nm和254 nm）测定紫外吸收和原子吸收分光光度法 测定Cd、Zn元素含量两种方法确定洗脱液小分子量金属结合蛋白峰管；通过试验比较它们的紫外扫描特性、热稳 定性、镉锌元素比值和氨基酸组成。【结果】肝脏分离蛋白分子量为6.0～10.0 kD，有254 nm特征紫外吸收峰， OD250nm/OD280nm 的值为 13.13，有较好的热稳定性，不被无水乙醇抽提，每摩尔物质中 Cd 与 Zn 的摩尔比为 4.7 ﹕2， 半胱氨酸相对比例为 32.89%、不含芳香族氨基酸、氨基酸组成与 MT 的理论值非常接近。睾丸分离蛋白无 254 nm 特征紫外吸收峰，Cd结合能力低，半胱氨酸相对含量只有2.36%，氨基酸组成与MT的理论组成相差较大。【结论】 雄性动物睾丸对镉暴露敏感性高的原因是睾丸中不能被诱导产生能够拮抗重金属镉毒性作用的特殊蛋白质——金 属硫蛋白。 关键词：睾丸；肝脏；镉；敏感性；金属硫蛋白 Isolation and Comparison of Low-Molecular-Weight Metal Binding Protein in Testis and Liver of Rabbits Treated with Cadmium 1 1 1 1 1 1 BIAN Jian-chun , GUO Heng-jie , WANG Han-dong , LIU Xue-zhong , YUAN yan , REN Jian-xin , 1 1 2 3 LIU Zong-ping , WANG Zong-yuan , KANG Shi-liang , WU Rui 1 2 ( College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu; College of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Haerbin 150030 ; 3 College of Veterinary Medi