降解菌DDS-1产3-AC-DON氧化酶的酶学特性.pdfVIP

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中国农业科学 2013,46(11):2240-2248 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.11.007 降解菌DDS-1 产3-AC-DON 氧化酶的酶学特性 1,2 1,2 1,2 1 1 1 徐剑宏 ,潘艳梅 ,胡晓丹 ,祭 芳 ,殷宪超 ,史建荣 1 (江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全 2 控制技术与标准重点实验室/江苏省转基因安全评价公共服务中心,南京 210014 ; 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程 重点开放实验室,南京 210095 ) 摘要:【目的】研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)降解菌Devosia sp. DDS-1 产生的3-AC-DON 氧化酶的酶学特性,掌握DDS-1 降解3-AC-DON 到3-酮基-DON 特性,为该酶的开发应用奠定理论基础。【方法】 LG 培养基培养DON 毒素降解菌Devosia sp. DDS-1 后,用PBS 离心洗涤菌体后采用超声波破碎,用硫酸铵沉淀菌 体破碎液获得粗酶液;然后在不同的酶反应体系中检测 3-AC-DON 氧化酶的酶活性。【结果】降解菌DDS-1 产生 3-AC-DON 氧化酶的最适条件为:pH 7.0、25℃、培养36 h;该酶酶反应的最适温度为35℃,最适反应pH 为7.0; -1 该酶在20—40℃,pH 5.0—9.0 的范围内能保持80%以上的酶活性;大多数金属离子在浓度为0.2—2 mmol·L 对 3-AC-DON 氧化酶有促进作用;乙二胺四乙酸(EDTA)对该酶活性有抑制作用;酶的定域试验结果显示该酶为胞内 酶;DDS-1 产生的粗酶液能很好地降解小麦中的DON、3-AC-DON 毒素。【结论】Devosia sp. DDS-1 产生的3-AC-DON 氧化酶的酶学特性研究表明,DDS-1 产生的3-AC-DON 氧化酶具有较好的温度和酸碱稳定性,该酶反应需要金属离 子作为辅因子。 关键词:3-AC-DON;降解;徳沃斯氏菌;酶活性 Enzymatic Characteristics of 3-Acetyl Deoxynivalenol Oxidase by Devosia sp. DDS-1 1,2 1,2 1,2 1 1 1 XU Jian-hong , PAN Yan-mei , HU Xiao-dan , JI Fang , YIN Xian-chao , SHI Jian-rong 1 ( Institute of Safety and Detection of Food Quality, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/Key Lab of Food Quality and Safety of Jiangsu Province-State Key Labora

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