家蚕幼虫期和蛹期马氏管差异蛋白质组学分析.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(9): 1833-1839 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.09.019 家蚕幼虫期和蛹期马氏管差异蛋白质组学分析 邹 勇，钟晓武，张利平，赵 萍，夏庆友 （西南大学蚕学与系统生物学研究所/家蚕基因组学国家重点实验室，重庆 400716 ） 摘要：【目的】深入了解家蚕幼虫期与蛹期马氏管蛋白质组的变化，为马氏管在不同发育时期的功能研究提 供蛋白质水平上的依据。【方法】利用蛋白质双向电泳技术对家蚕5 龄第5 天及化蛹第1 天的马氏管组织进行比较， 并采用基质辅助激光解析飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对表达量差异较大的蛋白点进行肽指纹图谱鉴定，应用 GPMAW 8.00 软件对NCBI 蛋白质数据库中所有来自于P50/Dazao 的蛋白质与家蚕9 倍基因组预测蛋白质库共同构 建本地数据库，对试验采集到的肽指纹图谱进行分析。【结果】共检测到360—430 个蛋白点，主要分布在分子质 量15—80 kD、等电点4.0—9.5。2 个时期共成功鉴定17 个表达量有显著差异的蛋白质，其中包括与能量代谢相 + 关蛋白质、热激蛋白、V 型H ATP 合酶、30K 蛋白以及与肾脏功能密切相关的丙氨酸-乙醛酸氨基转移酶 2,3-羟 基异丁酸脱氢酶等。【结论】本研究中差异蛋白质的发现和鉴定为完全变态昆虫幼虫期与蛹期马氏管的功能差异提 供了蛋白质水平上的理论依据。 关键词：家蚕；马氏管；双向电泳；MALDI-TOF-MS Proteomic Comparison on Malpighian Tubules Between Larvae Stage and Pupal Stage of Silkworm (Bombyx mori) ZOU Yong, ZHONG Xiao-wu, ZHANG Li-ping, ZHAO Ping, XIA Qing-you (Institute of Sericulture and Systems Biology, Southwest University/State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Chongqing 400716) Abstract : 【Objective 】 The objective of this study is to get more information of malpighian tubules on the proteome changes between larvae stage and pupal stage, and to provide new evidences on the protein level at different developmental stages of malpighian tubules of B. mori. 【Method 】 The matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry were applied for identifying the different spots which had more expression of the 2D map, and all the protein sequences from P50/Dazao on NCBI combined silkworm proteins database were used to build local-database by the software GPMAW 8.00. GPMAW was also used to a