微孔板法检测番茄灰霉病菌对杀菌剂的敏感性.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(15):3075-3082 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.15.008 微孔板法检测番茄灰霉病菌对杀菌剂的敏感性 杨晓楠，王 猛，申瑞平，刘 峰 （山东农业大学植物保护学院，山东泰安 271018 ） 摘要：【目的】利用酶标仪建立番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea ）对杀菌剂敏感性的快速、高效测定方法。 【方法】以OD 增加值作为评价指标，确立微孔板法检测灰霉病菌敏感性的测试条件，并对啶酰菌胺、嘧菌酯、乙 霉威、甲基硫菌灵、异菌脲、苯醚甲环唑6 种常用杀菌剂对灰霉病菌孢子萌发和菌丝生长的抑制效果进行评价， 将结果与孢子萌发法和菌丝生长速率法所得结论进行比对。【结果】微孔板法测定条件为：酶标仪测定波长为630 5 6 nm，测试培养基为灰霉分生孢子萌发刺激液（PDE），孢子悬浮液浓度为8×10 —1.6×10 个/mL，培养条件为21℃ 黑暗条件下振荡（150 r/min），孔中加入孢子悬浮液与药剂培养24 h 作为药剂对孢子萌发抑制作用的测试时间， 孔中孢子悬浮液培养 12 h 后再加入药剂培养12—24 h 为药剂对菌丝生长抑制作用的测试时间。测试结果与孢子 萌发法和菌丝生长速率法所得结论基本一致。用该方法测得啶酰菌胺对山东省3 个地区57 株灰霉病菌分生孢子萌 -1 发及菌丝生长的EC 均值分别为1.9311 和5.6488 μg·mL 。【结论】微孔板法综合了孢子萌发法和菌丝生长速率法 50 的优势，测试速度快、结果准确、重现性好，具有良好的实用性。 关键词：微孔板法；灰霉病菌；敏感性；测试条件 Microtiter Method to Test the Sensitivity of Botrytis cinerea to Fungicides YANG Xiao-nan, WANG Meng, SHEN Rui-ping, LIU Feng (College of Plant Protection, Shandong Agricultural University, Taian 271018, Shandong) Abstract ：【Objective 】The objective of this study is to establish a rapid and efficient method for testing the sensitivity of B. cinerea to fungicides by using the enzyme-labelling measuring instrument. 【Method 】With △OD value as an evaluation index, the conditions of microtiter method to test the sensitivity of B. cinerea to fungicides were optimized. The effect of six widely-used fungicides (boscalid, azoxystrobin, diethofencarb, thiophanate-methyl, iprodione and difenoconazole) again