scriptad和咖啡因对绵羊体细胞核移植效果的影响研究.pdfVIP

摘要 体细胞核移植技术对于动物育种、地方优良资源保存、濒危动物保护以及发育生 物学基础理论研究等均具有重要意义，但目前体细胞核移植成功率较低，已成为制约 这一技术应用的主要障碍，因此完善体细胞核移植技术体系，探明核移植技术机理乃 是当前急需解决的难题。 本研究采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂——S面ptaid处理绵羊核移植供体细胞以 及核移植胚胎以提高其组蛋白乙酰化水平，探讨了组蛋白乙酰化水平的提高对绵羊体 细胞核移植胚胎体外发育的影响。另外，对咖啡因在核移植胚胎体外发育过程中的作 用也进行了研究。 为了提高绵羊体细胞核移植效率，以绵羊卵丘细胞为核供体，在融合后的核质互 裂率、桑椹胚率以及囊胚发育率与对照组差异不显著(P0．05)，但囊胚细胞数显著 高于对照组(P0．05)。 Scriptaid处 采用不同浓度Scriptaid处理绵羊卵丘细胞，结果表明，以0．21．tmol／L 管采用0．21xmol／LScriptaid分别处理绵羊供体卵丘细胞和核移植胚胎时，囊胚发育率 显著提高(PO．05)，但采用0．21xmol／L Scriptaid同时处理供体卵丘细胞和核移植胚胎 对细胞有一定的毒性。 在激活后对胚胎进行培养的过程中，用0．21unol／LScriptaid对核移植胚胎进行不 不显著(PO．05)。 在绵羊核移植胚胎体外培养时加入0．21xmol／L 照组(PO．05)。 对0．21maol／LScriptaid处理绵羊卵丘细胞获得的不同发育时期核移植胚胎进行免 疫荧光染色，结果表明，1．细胞至8．细胞期的胚胎中H4K12乙酰化水平显著高于对 照组，但囊胚中H4K12乙酰化水平差异不显著；并且试验组和对照组囊胚内细胞团 和滋养层细胞间H4K12乙酰化水平差异均不显著(P0．05)。 胞数。采用0．21xmol／L Scriptaid分别处理绵羊供体细胞或胚胎时，均可显著提高核移 植胚胎囊胚发育率；并且试验组1一细胞、2．细胞、4．细胞和8．细胞核移植胚胎H4K12 乙酰化水平显著高于对照组。可见，核移植胚胎组蛋白乙酰化水平的提高有利于提高 其体外发育效率。 关键词：Scdptaid：咖啡因；绵羊；体细胞核移植；H4K12ac on Studiesontheeffectof andcaffine scriptaid sheep Nuclear somaticcell transplantation Author：Wen Bingqiang and Genetics，BreedingReproduction Major：Animal Li Supervisor：ProfessorJun-jie Abstract Somaticcellnuclear a whichisbenefit transplantationfSCNT)iSpowerfultechnique foranimal animal anditalso an rolefor br