在猪精液冷冻稀液中添加褪黑素、谷胱甘肽、vc对冷冻保存效果的影响.pdfVIP

摘 要 本试验以杜洛克猪为研究对象，用0．5ml细管精液冷冻剂型，对猪精液冷冻中的 过氧化损伤，以及加入抗氧化剂后对精液质量的影响进行了研究。旨在进一步揭示猪 精液冷冻过程中的过氧化损伤机理，筛选出较好的抗氧化剂加入冷冻稀释液，提高冷 冻．解冻后精液质量。 用活性氧初级荧光测定试剂盒检测精子冷冻过程中活性氧含量的变化，平衡后， 活性氧含量有轻微升高，冷冻一解冻后则急剧升高(尸0．01)。分别检测鲜精、平衡后 精液及冷冻．解冻后精液质量指标：活率、活力、顶体完整性、线粒体活性，精液质量 指标极显著下降(PO．01)。用SPSS13．0分析发现精子中活性氧的含量与精子质量 指标呈极显著强负相关，活率、活力、顶体完整性、线粒体活性与ROS含量相关系 数分别为．0．879、．0．958、．O．819、．0．960。 离心3min能显著提高精子活率、活力、线粒体活性(PO．05)。 首次在猪精液冷冻稀释液中加入褪黑素，浓度分别为0．125mg／ml，0．25mg／ml， O．5mg／ml。加入0．25mg／ml褪黑素能显著提高精子活力、项体完整率、线粒体活性 (PO．05)。 mmol／L，及10mmol／L， 在猪精液冷冻稀释液中分别加入谷胱甘肽lmmol／L，5 结果5mmol／L的谷胱甘肽能极显著提高精子冻后活率、活力、线粒体活性(尸O．01)。 两浓度之间差异不显著。 首次对于褪黑素、谷胱甘肽及维生素C的联合添加采取正交设计的试验方法， 用SPSS13．0分析，褪黑素与谷胱甘肽的交互作用显著，而其余两两组合之间交互作 用不显著。同时发现维生素C的添加应避免稀释液中亚铁离子和亚铜离子的存在， 以免催化维生素C的氧化，产生过氧化氢而损害质膜。 进一步分析褪黑素和谷胱甘肽的联合添加效应，加入O．125 mg／ml的褪黑素及 lmmol／L的谷胱甘肽能显著提高解冻后精子活率、活力、顶体完整性和线粒体活性(尸 0．05)。褪黑素与谷胱甘肽的联合添加比谷胱甘肽及褪黑素单独添加效果好。 mg／ml的褪黑素 综上所述，本试验推荐以2400xg，离心3min，联合添加0．125 及lmmolFL的谷胱甘肽能取得较好的试验效果。 关键词：猪精液，冷冻保存，氧化损伤，褪黑素，谷胱甘肽 Effectoftheadditionofmelatonin、readucedand glutathione vitamineC theboarsemenextenders to LI and By Bo—ling(AnimalGenetics，BreedingReproduction) Directed byprof．MAHeng-dong ABSTRACT The researchstudiedthe ofboarsemenandtheeffect present damage peroxidation ofadditionofantioxidantsonthesemen in andintendto qualitycryopreservation revealthemechanism and betterantioxitantsaddedto