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分离哺乳动物x精子的初步研究
磋士论文:分离嚷巍尊糖XY耩子翦镪多簪}究
分离哺乳动物XY精予的初步研究
摘要
本研究的目的鼹探讨影l向精子分离的因素,初步建立起流戏细胞仪分离哺乳
动物X精予和Y精予的程序和方法。
慕燕回来罴l于癸黢豹壤渡,缀暹品质谭是麟_曩l耩子稀释滚(TALP)灏释,
与Hoechst33342在35℃水浴中孵育染色60rain,染色绩束后加入食物色素
(FD&c撑40)着色去除死亡精子,利用流式缁胞仪根据精予核DNA含量的差别
将X糨子和Y耩子分离。
绪装发瑷:在穗子分离之裁,对黄牛新鳞耩滚分期进行赢接保存、TAIp稀
著(P《o.01);用山革断尾精子调试流式细胞仪,正确定向的断尾精子达到69%,
糗溺CV遮弱7
l,鲇%;氆羊巍承警活糖子染怠辩,Hoechst33342滚度至爹分羽
DNA时墨现双峰;山革和水牛的糯鲜精液平均糨子活率为86%和80%时,在
率随着滕力的提高而下降;水牛精予分离之后,利用重分析方法进行了4次分离
准确率谬定,x壤子警缝准确率达翻94%,Y耱予孚鹭准确警达到89%。分蔫
的活率下降到了49%,=者差异檄摄著(Po.叭)。
以上试验绩栗袅溺,在耳翦盼系统下已经秘步建立起7滚戏缨琏佼分鬻骧襞
动物XY精子豹方法翔程序。
关键词:哺乳动物;th羊;水牛;x’|,精予;糖子分离:流式纲臆仪
硕士论文:分离哺乳动物XY精子的蕃u步研究 摘要
FLOW
STUDYON
PRELIMINARY
THEXANDY
SoRTING
MAMMALIANSPERM
ABSTRACT
The wasto thefactors and
present
study investigate affectingspermsorting
set of
the flow theXandY
preliminarilyup procedurecytometricaily
sorting
mammalian
chromosome-bearingsperm.
of and
buffalowerecollectedfromtheherdbull
Ejaculates station
bull,goat
andthe and semenwas
pasture.Aftermorphologymotilityexaminations,the
dilutedinmod诳edTALPandincubatedwith
Hoechst33342at35℃for60min
tostainthe DNA.FD&C#40was
addedafter
sperm incubafiontoquench
Hoechst33342inthe
dead thentheXandY
sperm.And
flow
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