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分离哺乳动物x精子的初步研究

磋士论文:分离嚷巍尊糖XY耩子翦镪多簪}究 分离哺乳动物XY精予的初步研究 摘要 本研究的目的鼹探讨影l向精子分离的因素,初步建立起流戏细胞仪分离哺乳 动物X精予和Y精予的程序和方法。 慕燕回来罴l于癸黢豹壤渡,缀暹品质谭是麟_曩l耩子稀释滚(TALP)灏释, 与Hoechst33342在35℃水浴中孵育染色60rain,染色绩束后加入食物色素 (FD&c撑40)着色去除死亡精子,利用流式缁胞仪根据精予核DNA含量的差别 将X糨子和Y耩子分离。 绪装发瑷:在穗子分离之裁,对黄牛新鳞耩滚分期进行赢接保存、TAIp稀 著(P《o.01);用山革断尾精子调试流式细胞仪,正确定向的断尾精子达到69%, 糗溺CV遮弱7 l,鲇%;氆羊巍承警活糖子染怠辩,Hoechst33342滚度至爹分羽 DNA时墨现双峰;山革和水牛的糯鲜精液平均糨子活率为86%和80%时,在 率随着滕力的提高而下降;水牛精予分离之后,利用重分析方法进行了4次分离 准确率谬定,x壤子警缝准确率达翻94%,Y耱予孚鹭准确警达到89%。分蔫 的活率下降到了49%,=者差异檄摄著(Po.叭)。 以上试验绩栗袅溺,在耳翦盼系统下已经秘步建立起7滚戏缨琏佼分鬻骧襞 动物XY精子豹方法翔程序。 关键词:哺乳动物;th羊;水牛;x’|,精予;糖子分离:流式纲臆仪 硕士论文:分离哺乳动物XY精子的蕃u步研究 摘要 FLOW STUDYON PRELIMINARY THEXANDY SoRTING MAMMALIANSPERM ABSTRACT The wasto thefactors and present study investigate affectingspermsorting set of the flow theXandY preliminarilyup procedurecytometricaily sorting mammalian chromosome-bearingsperm. of and buffalowerecollectedfromtheherdbull Ejaculates station bull,goat andthe and semenwas pasture.Aftermorphologymotilityexaminations,the dilutedinmod诳edTALPandincubatedwith Hoechst33342at35℃for60min tostainthe DNA.FD&C#40was addedafter sperm incubafiontoquench Hoechst33342inthe dead thentheXandY sperm.And flow

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