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低能离子诱变选植物乳杆菌高产cla菌株的研究
^▲r。
087181
国家自然科学基金(3 2)项目
资 助
The ectwasfinanced
NationalNaturalScience
proj by
FoundationofChina
7181
(3082)
●
0
_
捅 要
acid,CLA)的植物乳杆菌为
本研究以一株产共轭亚油酸(Conjugatedlinoleic
出发菌株,以10key氮离子对出发菌进行多次诱变选育,以期得到一株高产CLA
的诱变菌株,并且对该诱变菌株适宜产CLA的条件进行了研究,同时为了比较出发
菌株和诱变菌株在分子水平的差异,利用30条随机引物对出发菌株和诱变菌株进
行了RAPDLE较分析,并且应用SDS—PAGE技术作为研究出发菌株和诱变菌株遗传突
变分析的辅助手段。主要研究结果如下:
1013
1.在注入能量为10keV,剂量为O(对照卜120×2.6Xions/cm2条件下对出发菌
株ANCLA02进行诱变,结果表明:存活曲线与文献报道的“马鞍型”曲线基
本符合。注入诱变高产CLA菌株的适宜剂量为60X2.6×1013N+/em2。筛选获得
诱变菌株经5代培养,产CLA性能稳定。
2.对诱变菌株适宜产CLA条件进行了初步研究,得到植物乳杆菌的最适产CLA条件
为:亚油酸为诱导物,并且亚油酸添加量为0.1%,菌株的接种量为4%,初始PH
为6.5,在37℃条件下发酵培养24d,时,可使CLA产量达到最大。
3.将出发菌株和诱变菌体进行全细胞蛋白电泳,比较出发菌株和诱变菌株菌体内
蛋白质表达的差异,结果显示:出发菌株和诱变菌株在全细胞蛋白的表达上无
差异。
4.本试验共选用了30条随机引物,用他们对出发菌株和诱变菌株进行扩增,结果
表明:低能离子注入引起了植物乳杆菌DNA的突变,在30条随机引物中,有4
条引物在两池间有扩增产物,其中有两条在两池间表现出多态性,多态性扩增
的引物频率为6.67%,且多态性稳定,重复性较好
RAPDSDS
关键词:乳酸菌 离子注入CLA
t
Abstract
Thistesttakesa lactobacillus strain,and
CLA-producingplantarum嬲original
studiesthe conditionsofsuch selective
strain,then
CLA-producing mutagenesis
is to strainwith10kev ionforseveral
conductedthe
development original nitrogen
to a the to
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