低能离子诱变选植物乳杆菌高产cla菌株的研究.pdfVIP

低能离子诱变选植物乳杆菌高产cla菌株的研究.pdf

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低能离子诱变选植物乳杆菌高产cla菌株的研究

^▲r。 087181 国家自然科学基金(3 2)项目 资 助 The ectwasfinanced NationalNaturalScience proj by FoundationofChina 7181 (3082) ● 0 _ 捅 要 acid,CLA)的植物乳杆菌为 本研究以一株产共轭亚油酸(Conjugatedlinoleic 出发菌株,以10key氮离子对出发菌进行多次诱变选育,以期得到一株高产CLA 的诱变菌株,并且对该诱变菌株适宜产CLA的条件进行了研究,同时为了比较出发 菌株和诱变菌株在分子水平的差异,利用30条随机引物对出发菌株和诱变菌株进 行了RAPDLE较分析,并且应用SDS—PAGE技术作为研究出发菌株和诱变菌株遗传突 变分析的辅助手段。主要研究结果如下: 1013 1.在注入能量为10keV,剂量为O(对照卜120×2.6Xions/cm2条件下对出发菌 株ANCLA02进行诱变,结果表明:存活曲线与文献报道的“马鞍型”曲线基 本符合。注入诱变高产CLA菌株的适宜剂量为60X2.6×1013N+/em2。筛选获得 诱变菌株经5代培养,产CLA性能稳定。 2.对诱变菌株适宜产CLA条件进行了初步研究,得到植物乳杆菌的最适产CLA条件 为:亚油酸为诱导物,并且亚油酸添加量为0.1%,菌株的接种量为4%,初始PH 为6.5,在37℃条件下发酵培养24d,时,可使CLA产量达到最大。 3.将出发菌株和诱变菌体进行全细胞蛋白电泳,比较出发菌株和诱变菌株菌体内 蛋白质表达的差异,结果显示:出发菌株和诱变菌株在全细胞蛋白的表达上无 差异。 4.本试验共选用了30条随机引物,用他们对出发菌株和诱变菌株进行扩增,结果 表明:低能离子注入引起了植物乳杆菌DNA的突变,在30条随机引物中,有4 条引物在两池间有扩增产物,其中有两条在两池间表现出多态性,多态性扩增 的引物频率为6.67%,且多态性稳定,重复性较好 RAPDSDS 关键词:乳酸菌 离子注入CLA t Abstract Thistesttakesa lactobacillus strain,and CLA-producingplantarum嬲original studiesthe conditionsofsuch selective strain,then CLA-producing mutagenesis is to strainwith10kev ionforseveral conductedthe development original nitrogen to a the to

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